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.1992年10月;40(10):1579-87.
doi:10.1177/40.1326577。

培养大鼠成纤维细胞的自噬、组织蛋白酶L转运和酸化

附属公司

培养大鼠成纤维细胞的自噬、组织蛋白酶L转运和酸化

E L Punonen公司等。 组织化学与细胞化学杂志. 1992年10月.

摘要

用冷冻免疫电镜方法阐明了培养成纤维细胞早期自噬空泡的酶传递和酸化机制。阳离子非依赖性甘露糖-6-磷酸受体(MPR)被用作溶酶体前室的标记,组织蛋白酶L和一种嗜酸胺(3-(2,4-二硝基苯胺)-3'-氨基-N-甲基二丙胺(DAMP),一种低氢细胞器的细胞化学探针)被用作前溶酶体和溶酶体室的标记。此外,阳离子化铁蛋白被用作内吞标记物。在超微结构双重标记实验中,所有抗原的大部分发现于含有紧密包裹膜材料的囊泡中。这些囊泡还含有少量内吞铁蛋白,可能与富含MPR的溶酶体前隔室相对应。在反高尔基网络中也可以看到一些免疫标记。此外,组织蛋白酶L、DAMP和大量铁蛋白在可归类为成熟溶酶体的较小囊泡中发现。早期自噬液泡被定义为含有可识别细胞质的囊泡。早期空泡中检测到MPR、组织蛋白酶L和DAMP,但没有检测到铁蛋白。莫能菌素抑制早期液泡中的酸化并不能阻止MPR和组织蛋白酶L的传递。液泡中MPR的存在表明组织蛋白酶L-不能仅通过与成熟的、缺乏MPR的溶酶体融合而传递到早期自噬液泡。此外,尽管溶酶体中含有内吞铁蛋白,但在自噬液泡中未检测到。转高尔基体网络或富含MPR的前溶酶体可能是成纤维细胞自噬空泡的酶和酸化机制的主要来源。(摘要删减为250字)

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