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.2001年7月20日;276(29):27462-9.
doi:10.1074/jbc。M102940200。 Epub 2001年4月19日。

整合素连接激酶对蛋白激酶B/Akt丝氨酸473磷酸化的调节:激酶活性和氨基酸精氨酸211和丝氨酸343的关键作用

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整合素连接激酶对蛋白激酶B/Akt-serine 473磷酸化的调节:激酶活性和氨基酸精氨酸211和丝氨酸343的关键作用

S Persad公司等。 生物化学杂志. .
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摘要

蛋白激酶B(PKB/Akt)是细胞存活和凋亡的调节器。为了完全激活,PKB/Akt需要以磷脂酰肌醇(PI)3-激酶依赖的方式在两个位点(苏氨酸308和丝氨酸473)进行磷酸化。负责苏氨酸308磷酸化的激酶是PI3-激酶依赖性激酶-1(PDK-1),而丝氨酸473的磷酸化被认为是通过PKB/Akt自磷酸化以PDK-1依赖的方式调节的。然而,整合素连接激酶(ILK)也被证明以PI3-激酶依赖的方式调节丝氨酸473的磷酸化。ILK是直接磷酸化这个位点还是作为一个配体分子起作用一直存在争议。我们现在通过凝胶内激酶测定和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法表明,生物化学纯化的ILK可以直接磷酸化PKB/Akt。细胞提取物的共免疫沉淀分析表明,ILK可以与PKB/Akt和PDK-1复合,并且ILK可以破坏PDK-1/PKB的结合。激活环内ILK的氨基酸残基丝氨酸343是激酶活性及其与PKB/Akt相互作用所必需的。ILK的突变分析进一步表明,磷酸肌醇磷脂结合结构域内ILK的精氨酸211在PKB-丝氨酸473磷酸化的调节中起着至关重要的作用。ILK活性的高选择性小分子抑制剂也抑制ILK在体外和完整细胞中磷酸化PKB/Akt的能力。这些数据表明ILK是调节PKB/Akt的重要上游激酶。

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