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.2000年11月15日;227(2):279-93.
doi:10.1006/dbio.2000.9898。

通过对HuC启动子上游元件的分析,建立了具有荧光神经元的转基因斑马鱼

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通过对HuC启动子上游元件的分析,建立了具有荧光神经元的转基因斑马鱼

H C公园等。 求文献一篇. .
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摘要

HuC编码一种与果蝇(Drosophila elav)同源的RNA结合蛋白,作为神经元分化的良好早期标记。我们通过检测5’上游片段在活胚胎中驱动绿色荧光蛋白(GFP)表达的能力,对斑马鱼HuC基因的启动子进行了表征。我们确定2.8kb的5'侧翼序列足以限制GFP基因在神经元中的表达。核心启动子跨越251个碱基对,包含一个CCAAT盒和一个SP1序列,但转录起始位点附近没有TATA盒。假定的MyT1结合位点和至少17个E-box序列是维持HuC表达的神经元特异性所必需的。有趣的是,连续去除假定的MyT1结合位点和14个远端E盒似乎并没有消除神经元表达;相反,它导致GFP表达逐渐扩展到肌肉细胞。进一步去除三个近端E盒消除了GFP表达的神经元和肌肉特异性,并导致GFP在全身普遍表达。通过对HuC启动子关键成分的鉴定,建立了稳定的斑马鱼转基因系(HuC-GFP),其中GFP在神经元中特异表达。我们将智囊鱼(mib)与该品系杂交,以观察其在活mib(-/-)突变胚胎中的神经原表型。这一交叉说明了HuC-GFP鱼如何在未来用于识别和分析具有早期神经元异常模式的斑马鱼突变体。

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