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.2007年4月；9（5）：615-22。
doi:10.1016/j.micinf.2007.01.012。 Epub 2007年1月27日。

研究上皮细胞与宿主细胞相互作用的口腔和阴道白色念珠菌同时定植小鼠模型

杜达娜·拉赫曼 1, 穆克什·米斯特里, 塞尔瓦姆·塔瓦拉杰, 斯蒂芬·查拉科姆, 朱利安·纳格利克
附属公司

研究上皮细胞与宿主细胞相互作用的口腔和阴道白色念珠菌同时定植小鼠模型

杜达娜·拉赫曼等。 微生物感染. 2007年4月.

摘要

我们报道了一种新的低雌激素小鼠模型的建立，该模型同时在口腔和阴道白色念珠菌定植，在两个粘膜部位类似于人类念珠菌携带。每周肌肉注射和皮下注射5微克雌激素对增强口腔定植效果最佳，对阴道定植至关重要。在BALB/c小鼠中，一些白色念珠菌临床分离株（n=3）在口腔和/或阴道部位都有定植，但只有529L菌株能在5周以上的时间内100%的小鼠持续定植。实验室菌株SC5314和NCPF 3153没有定植模型；然而，NCPF 3156显示到第5周阴道定植。先前通过小鼠的传代增强了SC5314随后的定植。到第2周和第7周，用白色念珠菌毒力抗原（分泌的天冬氨酸蛋白酶2）进行鼻内免疫可显著减少或消除口腔和阴道真菌负荷。我们的同时粘膜定植模型将实验小鼠的数量减少了一半，可用于评估潜在的候选疫苗，并允许详细分析念珠菌自然定植状态下宿主与真菌的相互作用。

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利益冲突声明

作者没有相互冲突的经济利益。

数字

图1
图1
持续的口腔和阴道定植依赖于小鼠菌株和白色念珠菌三种小鼠（Balb/c、DBA/2和C57BL/6）(n个=6）被诱导进入假发情状态（见第2节）。如所述，用两株白色念珠菌临床人类分离物529L和实验室菌株SC5314。每周收集一次口腔拭子和阴道冲洗液白色念珠菌接种后1周和5周，单个小鼠的CFU/ml显示。白色念珠菌NCPF 3153提供了与SC5314类似的数据（未显示）。实验重复了至少两次，结果相似。
图2
图2
阴道持续定植白色念珠菌529L需要雌激素。给Balb/c小鼠注射雌激素或生理盐水一周后（见第2节）(n个=6）阴道接种白色念珠菌529L（临床人体分离物）或白色念珠菌NCPF 3153（实验室菌株）。收集每周阴道冲洗液并测定CFU/ml（平均值±S.E.M.）。使用C57BL/6小鼠（未显示）观察到类似数据。实验重复了至少两次，结果相似。
图3
图3
新鲜隔离白色念珠菌应变来自体内地点并不是建立殖民地的基本标准。BALB/c小鼠(n个=5）被诱导进入假发情状态，并按照两个临床描述进行口服和阴道接种白色念珠菌分离物GM2093和GM1055以及实验室菌株NCPF3156。每周收集一次口腔拭子和阴道冲洗液白色念珠菌接种后1周和5周，单个小鼠的CFU/ml显示。所有三种菌株在第1周都在这两个位点定植，但在第5周，只有60%的小鼠有一个或两个粘膜位点，持续时间低于529L（与图1相比）。
图4
图4
受试动物和对照动物组织切片的代表性显微照片。（A，B）接种后3周，通过雌激素处理（A）和未处理（B）动物阴道进行冠状切片。（C–E）在接种后2周（C）、3周（D）和5周（E），通过雌激素处理动物的口腔进行组织切片。插图显示了整个山脉的冠状面，方框区域代表了由白色念珠菌529L（A，颊粘膜；B，口腔底部；C，舌牙槽粘膜）。（F–H）在接种后2周（F）、3周（G）和5周（H）通过雌激素处理动物的阴道进行组织学冠状切片。比例尺=100μm。
图5
图5
实验室菌株的传代白色念珠菌SC5314增强口腔和阴道定植。雌激素处理的C57BL/6小鼠(n个=6）接种白色念珠菌SC5314包括所述的口服和阴道用药。1周后，仅2/6只小鼠经口定植，1/6只经阴道定植。一张单人床白色念珠菌在第2周，从相同的6只小鼠的口腔和阴道培养物中取出菌落（包围），再生，并分别重新导入口腔或阴道。再收集3周的口腔拭子（O/S）和阴道冲洗液（V/W）。显示了第1、2、3和5周的CFU/ml。在第3-5周，未发送信息的SC5314未在模型中定植（数据未显示）。
图6
图6
用假定的白色念珠菌毒力因子。Balb/c小鼠(n个=10）诱导进入假发情状态（见第2节），用5μg白色念珠菌分泌的天冬氨酰蛋白酶（Sap2）和1μg霍乱毒素或PBS（对照）。免疫后两周，小鼠口服和阴道注射白色念珠菌529L（如上所述）。每周收集口腔拭子和阴道冲洗液，并额外跟踪真菌负荷5周（平均值±S.E.M.）。在第2周经口观察真菌负荷显著减少(*P（P）<0.05）和第7周均口服(**P（P）<0.001）和阴道(**P（P）<0.0001）。这些数据代表了两个独立的实验。
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