A mutant form of the Ran/TC4 protein disrupts nuclear function in Xenopus laevis egg extracts by inhibiting the RCC1 protein, a regulator of chromosome condensation.

M Dasso; T Seki; Y Azuma; T Ohba; T Nishimoto

doi:10.1002/j.1460-2075.1994.tb06911.x

EMBO J。1994年12月1日；13(23): 5732–5744.

数字对象标识：10.1002/j.1460-2075.1994.tb06911.x

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PMID：7988569

Ran/TC4蛋白的一种突变形式通过抑制RCC1蛋白（一种染色体凝集调节蛋白）破坏非洲爪蟾卵提取物中的核功能。

M Dasso公司,T Seki公司,Y Azuma公司,T欧姆巴、和T西本

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摘要

Ran蛋白是一种小GTPase，与包括转运在内的大量核过程有关。RNA处理和细胞周期检查点控制。类似的核活动谱表明需要RCC1，即Ran的鸟嘌呤核苷酸交换因子（GEF）。我们使用非洲爪蟾卵提取物系统和纯化蛋白的体外检测来研究Ran或RCC1如何参与这些众多过程。在这些研究中，我们使用突变的Ran蛋白来干扰核组装和功能。添加细菌表达的Ran突变形式（T24N-Ran），预计主要处于GDP-结合状态，严重破坏了提取物中的核组装和DNA复制。我们进一步研究了T24N-Ran干扰正常核活性的分子机制，发现T24N-Ran与提取物中的RCC1蛋白紧密结合，导致其作为GEF失活。T24N-Ran-blocked间期提取物从脱膜精子染色质中组装细胞核并复制其DNA的能力可以通过补充过量RCC1来恢复，从而提供过量的GEF活性。相反，通过添加高水平野生型GTP-结合的Ran蛋白，在缺乏RCC1的提取物中拯救了核组装和DNA复制，这表明RCC1在爪蟾间期提取物中除了作为GEF的作用外，没有其他重要功能。

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