医学杂志Primatol。作者手稿；PMC 2016年10月1日提供。
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反复低剂量SIVmac251攻击雌性恒河猴的月经周期与阴道感染的关系
，2 ，三 ，三 ，1 ，1 ，三 ，1和1,4
莫妮卡·莫里斯
2Total Solutions，美国佐治亚州亚特兰大
Siddapa N.Byraredy公司
三美国佐治亚州亚特兰大埃默里大学医学院病理学和实验医学系
弗朗索瓦·维林格
三美国佐治亚州亚特兰大埃默里大学医学院病理学和实验医学系
塔拉·C·海宁
1美国佐治亚州亚特兰大市疾病控制中心国家艾滋病毒/艾滋病、病毒性肝炎、性病和结核病预防中心艾滋病毒/艾滋病预防科实验室分部
凯瑟琳·巴特勒
1美国佐治亚州亚特兰大市疾病控制中心国家艾滋病毒/艾滋病、病毒性肝炎、性病和结核病预防中心艾滋病毒/艾滋病预防科实验室分部
阿夫塔布·A·安萨里
三美国佐治亚州亚特兰大埃默里大学医学院病理学和实验医学系
珍妮特·麦克尼科尔
1美国佐治亚州亚特兰大市疾病控制中心国家艾滋病毒/艾滋病、病毒性肝炎、性病和结核病预防中心艾滋病毒/艾滋病预防科实验室分部
埃伦·克什
1美国佐治亚州亚特兰大市疾病控制中心国家艾滋病毒/艾滋病、病毒性肝炎、性病和结核病预防中心艾滋病毒/艾滋病预防科实验室分部
1美国佐治亚州亚特兰大市疾病控制中心国家艾滋病毒/艾滋病、病毒性肝炎、性病和结核病预防中心艾滋病毒/艾滋病预防科实验室分部
2Total Solutions，美国佐治亚州亚特兰大
三美国佐治亚州亚特兰大埃默里大学医学院病理学和实验医学系
4通讯作者联系信息：Ellen Kersh，1600 Clifton Rd NE，MS A25，Bldg 17，rm 3229，Atlanta，GA 30333，电话404 639 2728
摘要
月经周期中不同的敏感性可能是雌性恒河猴S（H）IV感染风险的一个因素。我们回顾性地确定了一组参与HIV传播试验的恒河猴（n=11）的阴道SIV感染时间点与月经周期的关系。九只恒河猴中有八只在月经前后感染。
关键词：SIV、孕酮、恒河猴、月经周期
介绍
恒河猴的实验性阴道S（H）IV感染可能比猪尾猴更不可预测[4，7]. 这限制了该物种在女性艾滋病毒干预研究中的使用。一种假设是，月经周期和不规则周期内的易感性波动会导致不可预测性。为了解决这个问题，我们在最近完成的一项传播研究中估计了恒河猴成功感染后月经周期内的感染时间点[1].
使用了重复低剂量SIVmac251病毒暴露模型，从而模拟了并非所有HIV暴露都会导致感染的人类条件。该模型改编自猪尾猕猴模型，在该模型中，我们先前总结了43只感染SHIV的猪的感染时间点，作为HIV预防研究的对照[5，13]. 我们还记录了另外3只未感染的猪尾的循环[5]. 我们报道了猪尾猕猴在月经前一周和月经后一周对SHIV感染的敏感性最高[5]. 这可能是由于免疫和阴道上皮的激素调节波动[14]. 然而，与辫子不同的是，野生猕猴群体是季节性繁殖者，在秋季和冬季交配和受孕，在春季和夏季分娩，以及社会等级制度[三，8]. 据报道，小组成员的排卵是可变的，只有一些小组成员生产，通常只在春季生产[三]. 目前尚不清楚这些过程在圈养条件下是如何进行的，以及它们是否会影响实验性SIV的获取。在这项初步研究中，我们回顾性地测定了9只受感染恒河猴和2只在接受6次阴道挑战后仍未感染的恒河猴的月经周期与SIV传播时间点的关系[1].
方法
猕猴
12只笼养成年雌性印度恒河猴(猕猴)在一项测试抗a4b7整合素治疗的研究中，印度血统用作模拟IgG治疗的对照[1]. 他们出生并居住在埃默里大学（佐治亚州亚特兰大）耶基斯国家灵长类动物研究中心（YNPRC）[1]. 根据实验动物资源研究所的指导方针并经埃默里大学IACUC批准，对动物进行饲养[1，9].
病毒挑战，激素分析
从2月开始，恒河猴（n=12）接受1:20稀释度（5000 TCID）的阴道内挑战50)每周一次将SIVmac251加入1.0 ml RPMI中，在6次或更少的挑战后导致10只动物感染[1]. 挑战始于2月，因此发生在据报道持续到2月底的自行车赛季结束时。为了确定新生感染达到50拷贝/ml血浆的时间点，使用血浆等分样品上的bDNA定量来监测病毒载量[1]. 血浆在−80°C下冷冻，然后运至威斯康星大学国家灵长类动物研究中心进行孕酮分析[10，13]. ID为RCd12的感染动物[1]没有可供分析的样本。12只恒河猴血浆样本中只有11只可用于测量孕酮水平。血浆孕酮升高被认为是排卵的证据。我们将周期第一天定义为孕酮急剧下降后的时间点，如前所述[13]. 这使我们能够确定首次在大于50拷贝/ml血浆中检测到SIV感染时的月经周期时间点。
结果
十只动物在总共六次病毒暴露期间出现孕酮峰值()而一只动物RIq9没有(). 感染时，所有9只受感染的动物都在骑行。在月经周期的第1、6、6、8、12、12、14和27天记录第一次阳性病毒载量(). 两只猕猴仍未感染(); 动物Rlq9没有循环，RTm11的循环状态不确定。在在病毒攻击前的冬季几个月，偶尔进行测量，结果表明一些动物的孕酮峰值出现，尽管采样次数太少，无法进行有意义的月经周期诊断（). 9只受感染猕猴的初始病毒血症时间点为8只猕猴（95%）的卵泡期（周期第1-16天），而只有1只猕猴处于黄体期（周期17-32天，5%；). 考虑到病毒传播和首次检测到血浆病毒血症之间大约有7天的日食期，除了一只猕猴外，所有猕猴都在月经前一周或月经后一周感染了病毒(). 除RIq9和RTm11外，所有动物的孕酮峰值在3月和4月推迟或停止波动至少一个月().
讨论
我们利用机会样本研究恒河猴在月经周期中是否对阴道感染有波动的易感性，正如我们在猪尾猕猴身上所显示的那样。与猪尾猕猴类似，九只受感染的恒河猴中有八只在月经前后优先感染，这表明恒河猴在高孕酮水平下也更容易感染SIV[三，8，14]. 这也证实了Sodora等人的结果，他们发现当恒河猴在卵泡期或黄体期暴露时，黄体期的病毒获取增加[12]. 我们仅限于一项研究的样本，在该研究中，11名女性中有9人容易感染。无法全面研究为什么许多雌性恒河猴据说对阴道感染有抵抗力。所有9只受感染的动物都在骑自行车；这可能是由于一年中其他时间缺乏自行车运动导致的阻力。与此一致的是，两种抗药性动物中的一种没有骑行的证据()而我们的第二种抗药性动物在接触病毒时尚不确定，并且由于可用的血样很少，因此无法进行充分分析().
其他因素可能有助于猕猴的抗感染能力。例如，恒河猴的阴道上皮比猪尾猴厚得多，包括在整个月经周期中阴道表面角化程度更高，黄体期变薄程度更低[2，4，11].
每只猕猴的确切日食期尚不清楚，因为不可能确定是哪些反复的挑战导致了感染。因此，我们用了七天的时间来估计日食阶段，就像之前的研究一样[6]. 在常年接种病毒和对频繁采集的样本进行周期测定后，对其他动物进行分析将是有益的。这可以进一步阐明圈养猕猴的月经周期与阴道感染之间的关系，并进一步探讨雌性猕猴重复低剂量粘膜病毒暴露的有用性。
致谢
作者感谢齐格勒博士、威斯康星大学国家灵长类动物中心的丹·维特沃博士进行孕酮分析，以及埃默里大学的兽医和技术人员为本研究提供血浆样本。
这项工作由CDC和CDC与NIH之间的机构间协议（Y1-A1-0681-02）资助。还得到了NIH-NIAID AI-098628-01（给a.a.a.）和P51 OD11132给Yerkes国家灵长类动物研究中心的资助。
脚注
免责声明：这些结果和结论是作者的，不一定代表疾病控制和预防中心的官方立场
所有作者均声明无利益冲突。
在俄勒冈州波特兰市最近一次非人灵长类动物艾滋病模型年度研讨会上作为海报提交。
工具书类
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