分子细胞生物学。1990年12月；10(12): 6742–6754.
酿酒酵母液泡蛋白分选和液泡分离所需基因VPS34的特性。
摘要
VPS34基因功能是多种液泡蛋白有效定位所必需的。我们克隆并测序了野生型VPS34基因，以便更好地了解其蛋白产物在细胞内分选途径中的作用。有趣的是，VPS34基因座的破坏导致了对温度敏感的生长缺陷，表明VPS34仅在生长温度升高时对营养生长至关重要。与原始的vps34等位基因一样，vps34缺失突变体表现出严重的空泡蛋白分选缺陷，并且具有形态正常的空泡结构。VPS34基因DNA序列确定了一个开放阅读框，该阅读框可以编码875个氨基酸的亲水蛋白质。预测的蛋白质序列缺乏任何明显的信号序列或膜跨域，表明Vps34p不进入分泌途径。用TrpE-Vps34融合蛋白制备的抗血清进行免疫沉淀实验的结果与此预测一致：在野生型酿酒酵母细胞的提取物中检测到一种罕见的未糖基化蛋白，约95000 Da。细胞分馏研究表明，Vps34p的很大一部分与酵母细胞的颗粒部分有关。这种微粒Vps34p很容易通过2 M尿素而不是Triton X-100处理溶解，这表明这种颗粒结构中的Vps34p是由蛋白质相互作用介导的。vp34突变细胞在细胞分裂过程中，母细胞和子细胞之间的液泡室的正常分配也存在缺陷。在所检测的80%以上的三角洲vps34分裂细胞中，在新生芽中未观察到液泡结构，而在野生型分裂细胞中超过95%的芽具有可检测到的液泡隔室。我们的结果表明，Vps34p可能是一个相对较大的细胞内结构的组成部分，其功能是促进空泡蛋白传递和遗传途径的特定步骤。
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文章来自分子和细胞生物学由以下人员提供泰勒和弗朗西斯
