细胞生物学杂志。1973年5月1日;57(2): 551–565.
细胞悬液和组织的超微粉碎技术
摘要
固定组织的超低温冷冻术已经研究了多年,但到目前为止,由于几个原因,其成功受到了限制。本文报道的简单技术不仅可以对多种组织进行超低温切割,还可以对悬浮的单个细胞进行超低温冷冻切割,其超微结构细节的保存和可视化至少相当于传统包埋程序获得的超微结构细节。在这项技术中,为了控制切片的稠度,在冷冻之前将蔗糖注入戊二醛固定的组织块中。通过选择合适的蔗糖浓度和切片温度组合,可以顺利切片各种组织。悬浮在蔗糖溶液中的分离细胞通过切片悬浮液的冷冻液滴进行切片。将饱和或近饱和蔗糖溶液的小液滴悬浮在睫毛探针的尖端,用于将冷冻切片从刀口转移到网格基板或水面上。蔗糖液滴表面的部分熔化后,由于表面张力,它们会平展光滑。当单个细胞悬浮液的部分熔化时,单个细胞的部分仍局限于液滴表面的小区域。这些装置可以切割较宽的干燥部分,并避免在二甲基亚砜溶液中漂浮。通过适当的染色程序,可以观察到保存完好的超微结构细节。该技术通过许多组织制剂以及红细胞和细菌细胞悬浮液来说明。
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选定的引用
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- Bernhard W,Leduc EH。超薄冰冻切片。I.方法和超微结构保存。细胞生物学杂志。1967年9月;34(3):757–771. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
- Bernhard W,Viron A.超薄冰冻切片制备的改进技术。细胞生物学杂志。1971年6月;49(3):731–746. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
- Iglesias JR,Bernier R,Simard R.超低温冷冻:常规程序。超微结构研究杂志。1971年7月;36(1):271–289.[公共医学][谷歌学者]
- Bernier R,Iglesias R,Simard R.用氚化放线菌素D在超薄冰冻切片上检测DNA。细胞生物学杂志。1972年6月;53(3):798–808. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
- McLean JD,Singer SJ。用铁蛋白抗体结合物特异性染色细胞内抗原的通用方法。美国国家科学院院刊。1970年1月;65(1):122–128. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
- 阿拉斯加州克里斯滕森。用于电子显微镜的新鲜组织冰冻薄片,描述胰腺和肝脏。细胞生物学杂志。1971年12月;51(3):772–804. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
- MARINOZZI V.细胞核细胞化学超微结构——RNA ET蛋白内切酶。超微结构研究杂志。1964年6月;10:433–456.[公共医学][谷歌学者]
- 尼科尔森GL.蛋白质包埋叶绿体中光合装置的结构。细胞生物学杂志。1971年7月;50(1):258–263. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
- Caspar DL,Kirschner DA。10 A分辨率下的髓磷脂膜结构。自然新生物。1971年5月12日;231(19):46–52.[公共医学][谷歌学者]
- Knapeis GG,Carlsen F.骨骼肌M线的超微结构。细胞生物学杂志。1968年7月;38(1):202–211. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
- Rowe RW。骨骼肌纤维Z线的超微结构。细胞生物学杂志。1971年12月;51(3) :674–685。 [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
- HUXLEY先生。横纹肌中的双丝排列。生物物理与生物化学细胞杂志。1957年9月25日;三(5):631–648. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
- FARQUHAR MG,PALADE GE。肾小球蛋白吸收液滴中铁蛋白的分离。生物物理与生物化学细胞杂志。1960年4月;7:297–304. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
文章来自细胞生物学杂志由以下人员提供洛克菲勒大学出版社