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| 状态 |
2007年8月6日公开 |
| 标题 |
GSI，人类T-ALL |
| 有机体 |
智人 |
| 实验类型 |
按数组分析表达式
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| 总结 |
NOTCH信号级联在T细胞急性淋巴细胞白血病（T-ALL）和许多其他人类癌症中被解除调控，为分子治疗提供了一个有吸引力的靶点。一种方法使用γ-分泌酶抑制剂（GSIs）抑制细胞内NOTCH（NICD）的生成，导致细胞生长停滞和凋亡。在这里，我们显示FBW7的错义突变或纯合缺失，FBW7编码靶向NICD进行破坏的泛素连接酶，介导构成性NICD表达。FBW7突变针对与NICD结合所需的关键精氨酸残基。虽然Fbw7的突变形式仍然与MYC结合，但它们并不以MYC为降解目标，这表明NICD和MYC的稳定可能有助于Fbw7突变白血病的转化。FBW7突变的白血病抵抗MRK-003 GSI的生长抑制和凋亡作用。在一些表达NICD的抗性系中，这种抗性伴随着NOTCH靶向DELTEX1以及MYC mRNA和蛋白的持续mRNA水平，这意味着由于突变FBW7导致的NICD残留活性可能有助于GSI抗性。
关键词：T-ALL、γ-分泌酶、GSI、细胞系比较、FBW7突变
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| 总体设计 |
从培养细胞中分离的总RNA用于制造荧光标记的cRNA，并与DNA寡核苷酸杂交。简单地说，使用4µg总RNA通过逆转录合成dsDNA。cRNA由体外转录产生，并用Cy3或Cy5标记后合成。通过微阵列竞争杂交将标记cRNA的两个群体（参考群体和实验群体）相互比较。使用荧光染料反转策略对每个cRNA样本对进行两次杂交。人类微阵列含有约21000个基因对应的寡核苷酸探针。微阵列上的所有寡核苷酸探针都是用喷墨技术（安捷伦科技公司，加利福尼亚州帕洛阿尔托）原位合成的。杂交后，扫描阵列并记录每个探针的荧光强度。在对阵列强度数据进行归一化和校正后，获得转录物丰度比率（实验值与对照值）。使用Rosetta Resolver基因表达分析软件（华盛顿州西雅图Rosetta Biosoftware 6.0版）进行基因表达数据分析。
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| 贡献者 |
奥尼尔J，格里姆·J，皮带P，拉奥·S，提比特斯D，冬季C，哈德威克J，Welcker M公司，Meijerink日本，彼得斯R，德雷塔·G，西尔斯R，比利时克勒曼，看看 |
| 引文 |
17646409，20007543 |
| 提交日期 |
2007年7月9日 |
| 上次更新日期 |
2012年3月17日 |
| 联系人姓名 |
奥利维娅·方 |
| 电子邮件 |
olivia.fong@merck.com
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| 组织名称 |
默克公司。
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| 部门 |
分子剖析
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| 门诊化验室 |
默克研究实验室
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| 街道地址 |
邮政信箱2000
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| 西蒂 |
拉威 |
| 省/自治区 |
新冠肺炎 |
| 邮政编码 |
07065 |
| 国家 |
美国 |
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| 平台（1） |
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| 样品（36）
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| 关系 |
| 生物项目 |
项目编号A101469 |
