主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 抗GFP的兔单克隆抗体[EPR14104] 适用于:流式细胞周期(内部)、WB、IHC-P、ICC/IF 反应:物种独立
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 抗GFP的兔单克隆抗体[EPR14104] -
寄主物种 兔子 -
经过测试的应用程序 -
物种反应性 与以下物质反应: 物种独立性 -
免疫原 重组全长蛋白。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 WB:GFP转染293细胞裂解物。 IHC-P:GFP转基因小鼠结肠、胰腺和肝组织。 流式细胞术(内):GFP转染293细胞。 ICC/IF:GFP转染的NIH3T3和293细胞。
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一般注意事项
属性
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表格 液体 -
储存说明 在4°C下装运。 在+4°C下短期储存(1-2周)。 交付时,等分。 长期储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
解离常数(K 天 ) -
存储缓冲区 pH值:7.2 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:59%PBS、40%甘油、0.05%BSA -
浓度信息加载。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克隆性 单克隆 -
克隆编号 EPR14104型 -
同位素 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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备选版本 -
兼容的辅助设备 -
同位素控制 -
重组蛋白 -
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应用
目标
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相关性 功能: 能量转移受体。 其作用是通过能量转移将蛋白质的蓝色化学发光转换为绿色荧光。 在体内接受钙的能量时发出荧光 2+ -激活的光蛋白绿原。
子单元结构: 单体。
组织特异性: 光细胞。
翻译后修改: 包含由修饰氨基酸残基组成的发色团。 发色团由Ser-65和Gly-67之间的自催化主链缩合以及Tyr-66氧化为二氢酪氨酸形成。 生色团的成熟只需要分子氧。
生物技术应用: 绿色荧光蛋白已被工程化以产生大量不同颜色的突变体、融合蛋白和生物传感器。 荧光蛋白及其突变的等位基因形式,蓝色、青色和黄色,已经成为制造嵌合蛋白的有用且普遍的工具,它们在嵌合蛋白中起到荧光蛋白标签的作用。 通常,它们能耐受N端和C端与多种蛋白质的融合。 它们已在大多数已知的细胞类型中表达,并在活细胞和生物体中用作非侵入性荧光标记物。 它们能够在广泛的应用中发挥细胞谱系示踪剂、基因表达报告者或蛋白质-蛋白质相互作用的测量作用。 也可用作分子温度计,可以精确测量流体中的温度。 测量过程依赖于使用荧光相关光谱检测GFP闪烁。
序列相似性: 属于GFP家族。
生物物理化学特性: 吸收:Abs(max)=395 nm 在470 nm处显示较小的吸收峰。 荧光发射光谱在509 nm处达到峰值,肩部在540 nm处。 -
替代名称 GFP抗体 绿色荧光蛋白抗体
图像
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GFP转基因小鼠胰腺组织标记GFP的免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析,使用稀释度为1/100的纯化ab183734。 使用Tris/EDTA缓冲液pH 9进行热介导抗原检索。 ab97051型 以HRP结合的山羊抗兔IgG(H+L)作为二级抗体(1/500)。 使用PBS代替初级抗体的阴性对照。 苏木精复染。 -
ab183734染色GFP转染NIH3T3细胞中的GFP。 细胞用4%甲醛固定(10min),然后用0.1%PBS-Tween中的1%BSA/0.3M甘氨酸封闭1h。 然后在+4°C下用ab183734以1/500的稀释度培养细胞过夜,然后用 约150081 ,山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor®488),1小时,1μg/ml。 在相同的实验条件下,与转染NIH3T3细胞中GFP表达的基础水平相比,应用ab183734的细胞在488通道中发出更强的信号,表明ab183735与GFP结合,从而引发信号放大。 ab183734也应用于非GFP转染的NIH3T3细胞,其未产生阳性染色,表明GFP的特异性。 核DNA用1.43μM DAPI(蓝色)标记。 -
所有车道: 1/10000稀释(纯化)的抗-GFP抗体[EPR14104](ab183734) 车道1: GFP转染293细胞裂解物 车道2: 非转染293细胞裂解物 每车道10µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释度为1/100000 预测的带宽大小: 27千帕 观察到的频带大小: 25千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 阻塞和稀释缓冲液:5%NFDM/TBST。 -
对转染人TNFRSF9细胞的293T(人胚胎肾)进行细胞内流式细胞术分析,用纯化的ab183734标记GFP,稀释度为1/50(10ug/ml)(红色)。 细胞用4%多聚甲醛固定,用90%甲醇渗透。 山羊抗兔IgG(Alexa Fluor ® 647)(1/2000稀释)作为次级抗体。 使用兔单克隆IgG(黑色)作为同型对照,使用未与一级抗体和二级抗体孵育的细胞(蓝色)作为未标记对照。 -
石蜡包埋GFP转基因小鼠结肠组织(左)和正常小鼠结肠组织的免疫组织化学分析,用未纯化的ab183734在1/250稀释度下标记GFP,然后用预先稀释的HRP聚合物标记兔IgG。 苏木精会签。 在开始IHC染色方案之前,执行热介导抗原检索。 -
4%对甲醛固定GFP转染293细胞的免疫荧光分析,用未纯化的ab183734标记GFP,稀释1/500,然后用山羊抗兔IgG(Alexa Fluor)标记GFP ® 488)1/200稀释度的二级抗体(绿色)。 Dapi(蓝色)反染 -
在GFP转染的HEK-293(人类胚胎肾上皮细胞)裂解液上以0.004µg/ml的速度对不同批次的ab183734进行测试。每条通道中装载15µg裂解液。 在27 kDa下观察到的谱带。 -
所有车道: 1/10000稀释的抗GFP抗体[EPR14104](ab183734)(未纯化) 车道1: GFP转染293细胞裂解物 车道2: 非转染293细胞裂解物 每车道10µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 羊抗狂犬病IgG,(H+L),过氧化物酶结合物,1/1000稀释 预测的带宽大小: 27千帕 观察到的频带大小: 27千帕 -
小鼠胰腺组织(阴性对照)免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析,用稀释度为1/100的纯化ab183734标记GFP。 使用Tris/EDTA缓冲液pH 9进行热介导抗原检索。 ab97051型 以HRP结合的山羊抗兔IgG(H+L)作为二级抗体(1/500)。 阴性对照使用PBS代替一抗。 苏木精复染。 -
石蜡包埋GFP转基因小鼠肝组织(左)和正常小鼠肝组织的免疫组织化学分析,用未纯化的ab183734在1/250稀释度下标记GFP,然后用预先稀释的HRP聚合物标记兔IgG。 苏木精会签。 在开始IHC染色方案之前,执行热介导抗原检索。
数据表和文件
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SDS下载 -
数据表下载
合格证书
工具书类 (76)
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