概述
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产品名称 人 PEG10(EDR)敲除HeLa细胞系 -
亲代细胞系 希拉牌手表 -
有机体 人类 -
突变描述 利用CRISPR/Cas9实现基因敲除,纯合子:外显子2中1 bp缺失 -
通道编号 <20 -
淘汰验证 Sanger测序,Western Blot(WB) -
试验 -
生物安全水平 2 -
规则说明 建议控制: 人野生型HeLa细胞系( 约255928 ). 请注意,野生型细胞系不会自动包含在敲除细胞系订单中,如果需要,请使用代码WILDTYPE-TMTK1添加推荐的野生型细胞系,无需额外费用。 低温保存细胞培养基: 细胞冷冻介质-DMSO无血清培养基,在补充甲基纤维素的MEM中含有8.7%的DMSO。 培养基: DMEM(高糖)+10%FBS 初始处理指南: 到达后,小瓶应储存在液氮气相中,而不是-80°C。 在-80°C下储存可能会导致生存能力丧失。 1.在37°C水浴中解冻小瓶约1-2分钟。 2.将细胞悬液(0.8 mL)转移到含有8.4 mL预热培养基的15 mL/50 mL锥形无菌聚丙烯离心管中,用额外的0.8 mL培养基(总体积10 mL)清洗小瓶以收集剩余细胞,并在室温下以201 x g(rcf)离心5分钟。 10 mL代表建议的最小稀释度。 20 mL代表建议的最大稀释度。 3.将细胞颗粒重新悬浮在5 mL预热培养基中,并使用血细胞仪或其他细胞计数方法进行计数。 根据细胞计数,将种子细胞置于密度为2x10的适当细胞培养瓶中 4 细胞/厘米 2 。播种密度仅供参考,应根据各个实验室的时间表进行调整。 4.在37°C培养箱中用5%CO培养 2 。应每天监测培养物。 亚文化指南: 所有播种密度应基于通过既定方法获得的细胞计数。 引导播种密度为2x10 4 细胞/厘米 2 建议使用。 如果需要,在继代培养前24小时更换部分培养基可能有助于促进生长。 当细胞达到80-90%的汇合时,应进行传代。
本产品受The Broad Institute和ERS Genomics limited的有限使用许可,并采用专利技术开发。 有关有限使用许可证和相关专利的详细信息,请参阅我们的 有限使用许可证 和 专利页 . 我们将提供复苏时增殖的活细胞。
性能
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单元格数量 1 x 10 6 细胞/小瓶,1 mL -
粘附/悬浮 粘附剂 -
组织 子宫颈 -
单元格类型 上皮的 -
疾病 腺癌 -
性别 女性 -
STR分析 釉原蛋白X D5S818:11、12 D13S317:12、13.3 D7S820:8、12 D16S539:9、10 vWA:16、18 TH01:7型 TPOX:8、12 CSF1PO:9、10 -
无支原体 是的 -
存放说明 采用干冰运输。 储存在液氮中。 -
存储溶液 成分:8.7%二甲基亚砜、2%纤维素、甲醚 -
研究领域
靶
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功能 通过与凋亡介体SIAH1的相互作用防止肝细胞癌(HCC)细胞的凋亡。 也可能在促进细胞生长和肝癌形成中发挥作用。 通过与TGF-β受体ALK1相互作用抑制TGF-α信号传导。 当过表达时,诱导细胞延伸的形成,如与ALK1相关的丝状体。 参与脂肪细胞分化的早期阶段(通过相似性)。 可能与髓磷脂碱性蛋白(MBP)启动子中MB1结构域的5'-GCCTGTT-3'DNA序列结合。 -
组织特异性 在细胞滋养层表达,但在胎盘的合胞体滋养层上不表达。 在前列腺癌和乳腺癌中表达,但在正常乳腺和前列腺上皮细胞中不表达。 在HepG2细胞系中表达(蛋白质水平)。 表达于脑、肝、脾、肾、胸腺、肺、卵巢、睾丸、反应性淋巴结、骨骼肌、脂肪组织和胎盘。 在胰腺癌和肝细胞癌(HCC)中表达。 -
序列相似性 包含1个CCHC型锌指。 -
发展阶段 妊娠早期在胎盘中表达(蛋白质水平)。 在胎盘中,在缺氧早期下调,在妊娠11-12周时高度激活。 -
翻译后修饰 异构体RF1/RF2经历蛋白水解裂解。 -
细胞定位 核心。 细胞质。 主要在乳腺癌和前列腺癌、肝细胞癌(HCC)和B细胞慢性淋巴细胞白血病(B-CLL)细胞以及HepG2细胞系的细胞质中检测到。 用ALK1染色。 -
UniProt提供的信息
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KO细胞裂解物 -
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应用
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图片
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测序色谱图显示外显子2的序列编辑 -
所有车道: 抗-PEG10/EDR抗体[EPR20051]( 约215035 )稀释度为1/1000 车道1: 野生型HeLa细胞裂解物 车道2: PEG10敲除HeLa细胞裂解物 3号车道: HepG2细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗兔IgG H&L(IRDye®800CW)预吸附( ab216773号 )稀释度为1/10000 预测的带宽大小: 80千帕 观察到的频带大小: 100千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- ab215035年 在100 kDa时观察到。 红色-加载控制 约7291 在50 kDa时观察到。 约215035 抗-PEG10/EDR抗体[EPR20051]显示与野生型HeLa细胞中的PEG10/EDR特异性反应。 敲除细胞系ab265925(敲除细胞裂解物 约258103 )已使用。 对野生型和PEG10/EDR敲除样品进行SDS-PAGE分析。 约215035 和抗α-管蛋白抗体[DM1A]-负荷控制( 约7291 )分别在4°C下以1/1000稀释度和1/20000稀释度培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗小鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
纯合子:第2外显子1 bp缺失。
数据表及文件
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SDS下载 -
数据表下载