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(打、击等的)一下。作者手稿；PMC 2010年4月1日提供。
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(打、击等的)一下。2009年4月；40(4): 1451–1457.
2009年2月26日在线发布。 数字对象标识：10.1161/冲程108.535435
预防性维修识别码：项目经理2755234
NIHMSID公司：NIHMS109492美国国家卫生研究院
PMID：19246694

SK公司钙和IK钙大脑中动脉和实质动脉的通道、肌源性张力和血管舒张反应：缺血和再灌注的影响

玛丽莲·西波拉,1 杰里米亚·史密斯,1 梅根·M·科尔迈耶,2和朱莉·戈弗雷1
作者信息 版权和许可信息 PMC免责声明

摘要

背景和目的

SK的作用钙和IK钙在对照条件下以及脑实质小动脉（PA）和大脑中动脉（MCA）缺血再灌注（I/R）后，研究肌源性张力通道和内皮衍生超极化因子（EDHF）反应性。

方法

从缺血1小时再灌注24小时的雄性Wistar大鼠（n=12）或假对照组（n=1 2）中解剖MCA和PA。分别在加压至40 mmHg和75 mmHg的PA和MCA中比较基调和对阿帕明（300 nM）、TRAM-34（1.0µM）和硝基-L-精氨酸（L-NNA，0.1 mM）的反应性。SK公司钙和IK钙用实时PCR检测通道mRNA的表达。

结果

PA的基音大于MCA（42±4%对19±3%，p<0.01）。添加阿帕明和TRAM-34分别使PA的张力增加25±3%和16±2%，而MCA对这两种抑制剂均无反应。I/R后，PA对NOS抑制的反应减弱，而EDHF反应保持不变。此外，在对照组和缺血PA.SK中，受刺激的EDHF扩张被阿帕明部分逆转，而TRAM-34完全逆转钙和IK钙PA和MCA中的通道mRNA表达相似，I/R没有改变钙通道mRNA表达是SK的4-5倍钙频道。

结论

SK似乎钙和IK钙通道活性降低PA的基调，但不降低MCA。I/R后PA的EDHF反应性的保留表明，在NOS被抑制的条件下，这种血管舒张剂发挥着重要作用。

关键词：钾通道、血管张力、缺血性中风、实质小动脉

脑动脉和小动脉对压力变化的血管活性反应，称为肌源性反应，可能是脑血流自动调节（CBF）的重要因素。1此外，肌源性张力是脑血管阻力（CVR）的主要决定因素，通过限制破坏性静水压向微循环的传递，提供了一种重要的保护机制。2在大脑中动脉（MCA）区域，大脑（软脑膜）动脉和穿透性实质小动脉（PA）对CVR均有显著贡献。三然而，PA的独特之处在于，它们是长而基本上无分支的血管，将表面血管与微循环连接起来，在微循环中它们似乎是血流的瓶颈。4这些血管具有比MCA更大的基调，似乎对缺血和再灌注（I/R）更具抵抗力，因为它们不会像MCA一样失去肌原性张力和对压力的反应性。5–7

大脑内皮细胞通过产生血管活性因子，尤其是一氧化氮、前列腺素（PGI）来控制血管张力2)和内皮衍生超极化因子（EDHF）。8这些血管舒张剂对血管张力的相对贡献可能取决于血管的大小。9,10特别是，EDHF对脑血流和血管阻力的调节作用在小PA水平上可能最大。10此外，鉴于PGI2对脑血管几乎没有影响，大脑动脉和小动脉都有大量的基础NO生成，可以缓解静息状态下的紧张情绪。5,8事实证明，NOS抑制可使MCA和PA收缩并增加张力。5,8,11–13

离子通道的激活在调节内皮细胞膜电位和钙稳态方面起着重要作用，因此，在刺激反应中产生血管扩张剂。14特别是小钙和中钙激活的钾通道（SK钙和IK钙)刺激时产生内皮超极化。14–16在没有电压操作的钙通道的情况下，内皮细胞的超极化可能会增加钙进入的电化学驱动力，并且似乎是内皮介导的平滑肌超极化的重要初始步骤，这是EDHF扩张所必需的。17,18SK公司钙和IK钙通道表达在内皮细胞上，而不是血管平滑肌上，14,19特异性拮抗剂对其的抑制可阻断EDHF介导的舒张和超极化。20–22在大鼠MCA中，IK钙单独的通道抑制足以阻止EDHF扩张。20,21然而，当NOS激活时，SK钙通道也有助于内皮超极化。22有趣的是，MCA的基调水平不受阿帕明和TRAM-34（SK的特异性抑制剂）的影响钙和IK钙通道。21,22这一结果表明，与NO不同，EDHF在正常情况下不影响基音。然而，EDHF在PA中的功能重要性尚不清楚，PA是一种比MCA具有更大EDHF成分的血管。10EDHF在基础条件下的功能作用可能是CVR的一个重要但尚未被认识的决定因素。

在本研究中，我们调查了SK是否钙和IK钙抑制作用影响PA的基调以及这些通道在EDHF介导的舒张中的作用。此外，我们研究了I/R对这些通道的影响以及EDHF在PA中的作用，因为在这种情况下，NO介导的反应基本上被消除，并且假设EDHF可能在NO生成受到损害时充当备用血管扩张剂。5,9

材料和方法

局灶性缺血动物模型

所有程序均由机构动物护理和使用委员会批准，并符合NIH动物使用和护理指南。如前所述，MCA的临时细丝闭塞用于诱导雄性Wistar大鼠（N=35；280-300g）的I/R。5,7通过拆线将缺血动物暴露于缺血1小时和再灌注24小时。假对照组动物接受麻醉和中线切口，但未暴露于I/R。所有动物均接受丁丙诺啡（0.025 mg/kg皮下注射）镇痛。

脑血管和加压动脉造影仪的制备

用异氟醚（氧气中的2%）麻醉动物，斩首，迅速取出大脑并置于低温含氧生理盐水溶液（PSS）中。PA被确定为MCA的分支，以直角穿透大脑实质。一旦确定，周围的脑组织被仔细清理，血管被移除，放置在动脉造影室（佛蒙特州伯灵顿市生活系统仪器），并安装在玻璃套管上。在一些实验中，我们比较了来自同一动物的PA和MCA的反应。在这些病例中，MCA和PA都被仔细解剖并放置在动脉造影室中。如前所述进行了隔离容器实验。5,7,11

SK的PCR分析钙和IK钙MCA和PA中的信道

SK的表达钙和IK钙使用实时定量PCR（qPCR）的标准技术测定通道mRNA，并由佛蒙特大学的DNA设施进行。简单地说，从缺血（n=4）和假缺血（n=4）动物的同侧和对侧大脑中分离出MCA和PA，并在RNAlater中快速冷冻。然后将血管取出并放置在无核糖核酸酶的微离心管中，在RLT缓冲液中均质，并使用RNeasy Micro Kit（加利福尼亚州巴伦西亚市齐根）动物组织方案分离总RNA。为了提高产量，样品未经DNA酶处理。总RNA的浓度由NanoDrop ND-1000分光光度计（德国威明顿）获得，其完整性由安捷伦2100生物分析仪（加州圣克拉拉）分析。cDNA是使用SuperScript III试剂盒（Invitrogen，Carlsbad，CA）从总RNA中提取的。cDNA反应根据标准方案，使用随机六聚体和4.8 ng总RNA。实时PCR设置如下：10µl Universal PCR Master Mix（加州福斯特市Applied Biosystems）、1µl Assay on Demand（加州福斯特城Applied生物系统）、8µl water、1μl cDNA。靶基因SK3和SK4用于评估SK的mRNA表达钙2.3和SK钙3.1已知在内皮细胞中表达并有助于EDHF反应的通道。14,15,17,18所有靶基因（SK3代表SK钙，SK4用于IK钙使用Applied Biosystems的按需检测（Assays on Demand）进行评估，该检测经验证有效且未扩增基因组DNA。使用7900HT序列检测系统（加利福尼亚州福斯特市应用生物系统公司）对所有样品进行技术复制。PCR在50℃下循环2分钟，95℃下循环10分钟，然后在95℃下40个循环15秒，60℃下循环1分钟。

只使用Ct重复值<35（如果重复值的间隔大于1.0，则重新运行）。取Ct值的平均值，并使用ΔΔCt方法进行比较。23在MCA和PA之间以及缺血和假手术动物之间进行了三项mRNA表达比较：1）SK钙和IK钙假手术和缺血动物中PA相对于MCA的通道表达，以确定这两个血管段之间的通道表达是否不同；2） SK公司钙和IK钙相对于假手术，I/R后PA中的通道表达，以确定I/R是否影响通道表达；和，3）IK钙相对于SK的通道表达式钙PA中的通道表达，以确定一个通道的表达程度是否大于另一个通道。

SK公司钙和IK钙通道抑制与肌源性张力

从假对照组（n=6）或I/R组（n=6）后的动物身上解剖MCA和PA，将其安装在动脉造影室中，并在PA为40 mm Hg或MCA为75 mm Hg的条件下平衡1小时。使用这些压力是因为它们近似于这些容器所经历的压力体内.三在形成自发色调的平衡期后，将阿帕明（300 nM）、TRAM-43（1.0µM）和硝基-L-精氨酸（L-NNA，0.1 mM）依次添加到浴中，并测量管腔直径和壁厚。这些浓度的apamin和TRAM-34已被证明对SK具有选择性钙和IK钙通道。18因为apamin和TRAM-34可以引起MCA中的血管周围感觉神经去极化，但不能引起PA11，在添加MCA抑制剂之前，将辣椒素（1.0µM）添加到浴中。实验结束时，在零钙PSS中添加罂粟碱（0.1 mM），以获得完全松弛的直径。

SK的影响钙和IK钙EDHF的通道抑制

因为SK的作用钙和IK钙EDHF生产之前在MCA进行过研究，20–22我们调查了SK的作用钙和IK钙仅PA的EDHF响应通道。从假对照组（n=6）或I/R后（n=8）解剖PA，并将其安装在动脉造影室中。在40毫米汞柱的条件下，小动脉柄平衡1小时，在此期间形成自发张力。将L-NNA（0.1 mM）和吲哚美辛（10µM）分别添加到浴中以抑制NOS和环氧合酶（COX）。这些浓度已被证明能最大限度地抑制大鼠这些血管中的NOS/COX。10在抑制剂存在的情况下，将一种钙离子载体和内皮依赖性激动剂A23817累积添加到浴中（0.01至1.0µM），并在每次浓度稳定后记录直径。这是调查EDHF的常见方法。5,8,10,13,20接下来，将apamin（300 nM）和TRAM-34（1.0µM）依次添加到浴中并记录直径。在一些实验中（n=3），在阿帕明之前添加TRAM-34，以确定是否抑制IK钙单凭通道可以逆转EDHF扩张。最后，在零钙PSS中添加罂粟碱（0.1 mM），以获得完全松弛的直径。

药物和解决方案

所有实验均使用Krebs PSS（一种含5%CO的碳酸氢盐缓冲液2，10%O2和85%N2为了维持pH），离子组成为（mmol/L）：NaCl 119.0，NaCHO三24.0、KCl 4.7、KH2人事军官41.18，硫酸镁4A7H（A7H）2O 1.17，氯化钙21.6、EDTA 0.026和葡萄糖5.5。每周制备PSS，并在4℃下无葡萄糖保存；在每次实验之前，向PSS中添加葡萄糖。在不添加钙的情况下制备零钙PSS。Apamin和TRAM-34购自Tocris Biosciences（密苏里州Ellisville），并在使用前冷冻保存。辣椒素、L-NNA、吲哚美辛、钙离子载体A23187和罂粟碱购自西格玛（密苏里州圣路易斯）。

数据计算和统计分析

血管张力计算为罂粟碱完全松弛直径的直径减少百分比，公式为：（1-（φ语气/φ巴帕夫))*100%；其中φ语气=带色调和φ的容器直径巴帕夫=罂粟碱直径。收缩百分比计算为与基线相比直径变化的百分比，公式为：（1-（φ药物/φ基线))*100%; 其中φ药物=apamin、TRAM-34或L-NNA中的血管直径和φ基线=给药前的直径。

RQ值是通过首先计算ΔCt（目标基因Ct和内源性控制基因Ct之间的差异）和ΔΔCt（要比较的ΔCt's之间的差别）来确定的。RQ值计算为2-ΔΔCt.

所有数据均以平均值±扫描电镜（SEM）的形式呈现。采用单向方差分析确定语调和收缩百分比的差异，并在适当的情况下采用学生-纽曼-凯尔斯（Newman-Keuls）测试进行多重比较。

结果

SK的影响钙和IK钙肌源性张力的通道抑制

在第一个实验中，我们研究了SK的作用钙和IK钙调节同一动物PA和MCA的基调。来自假对照和缺血动物的MCA和PA的色调百分比如图1在控制条件下，PA的音调明显高于MCA（42±4%对19±3%；p<0.01）。阿帕明和TRAM-34的累积添加使PA收缩，表明EDHF正在影响这些血管的基调(图1A). 与PA不同，与之前的研究类似20–22、apamin和TRAM-34对MCA直径无影响(图1B). 然而，L-NNA对NOS的抑制导致PA和MCA收缩(图1).

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实质小动脉（A）和大脑中动脉（B）的色调百分比分别为40 mmHg和75 mmHg。在假对照组（灰色条）和缺血再灌注后（黑色条），在治疗前和累积添加apamin（300 nM）、TRAM-34（1.0µM）和L-NNA（0.1 mM）后显示血管张力。**p＜；0.01 vs.音调；⇞与Sham相比p<0.05；⇞⇞与Sham相比，p<0.01。

与之前的研究类似5–7I/R对PA肌原性张力无显著影响（42±4%vs.33±2%；p>0.05），但对MCA肌原性紧张度有显著影响（19±3%vs.8±2%；p<0.05）。在缺血PA中添加apamin和TRAM-34可引起收缩，但对I/R后的MCA无影响。重要的是，缺血PA对L-NNA抑制NOS几乎没有反应(图1).

图2显示了假对照组和缺血动物的PA和MCA在累积添加apamin、TRAM-34和L-NNA后收缩的百分比。比较收缩率可以比较血管对每种抑制剂的反应性。图2A结果表明，在对照动物的PA中，阿帕明引起的收缩明显大于TRAM-34，这一作用通过I/R逆转。重要的是，对L-NNA的收缩在对照小动脉中很强烈，但I/R后几乎完全消除。图2B显示对照组和缺血组动物的MCA对阿帕明和TRAM-34的收缩百分比最小。与SK不同钙和IK钙通道抑制，NOS抑制导致MCA显著收缩，I/R后未减弱。

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在40 mmHg和75 mmHg时，实质小动脉（A）和大脑中动脉（B）中apamin、TRAM-34和L-NNA累积增加的收缩百分比。显示了假对照组（灰色条）和缺血再灌注后（黑色条）之间的比较*与Sham相比p<0.05；**与Sham相比，p<0.01。

SK的影响钙和IK钙PA中EDHF上的信道

尽管SK的作用钙和IK钙在MCA中已经建立了EDHF产生的通道，这些通道在PA中EDHF介导的反应中的作用尚不清楚。图3显示了在假对照和缺血动物的NOS/COX抑制下对A23187的反应。注意，由于缺血PA对L-NNA缺乏反应性，其直径大于对照血管。A23187的添加导致两种类型的小动脉显著扩张，NOS/COX抑制作用在1.0µM时最大，与完全松弛的直径相似，这表明EDHF在这些小动脉中发挥了相当大的作用。I/R反应的EDHF成分几乎没有差异，只是缺血小动脉开始时张力降低，但仍完全扩张。

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在0.1 mM L-NNA和10.0µM吲哚美辛存在下，对钙离子载体A23187反应的实质小动脉直径。尽管缺血小动脉（开环）开始时的收缩程度低于假对照组（闭环），但两组血管都有明显的EDHF扩张。

研究表明，IK可以逆转EDHF介导的扩张钙仅存在通道抑制，SK几乎没有影响钙MCA中的通道。20–22然而，尚不清楚这些通道在PA-EDHF介导的反应中起什么作用。图4A显示了在存在完全扩张至A23187的NOS/COX抑制的情况下PA的直径追踪。添加阿帕明可引起相当大的血管舒缩，并部分逆转基于EDHF的舒张。然而，添加TRAM-34完全逆转了这种扩张，并将直径恢复到起始水平。当TRAM-34在阿帕明（n=3）之前给药时，它本身完全逆转了EDHF的扩张(图4B). 这些数据表明，与MCA、IK类似钙单独的通道抑制足以逆转PA中的EDHF扩张。

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apamin和TRAM-34逆转实质小动脉EDHF扩张。（A） 直径追踪显示在0.1 mM L-NNA和10.0µM吲哚美辛存在下的实质小动脉扩张为钙离子载体A23187。Apamin部分逆转，而TRAM-34完全逆转EDHF扩张。（B） 图中显示了在阿帕明之前给予TRAM-34的非缺血性实质小动脉的直径。注意，仅TRAM-34就完全逆转了A23187的扩张，而阿帕明几乎没有进一步的作用。（C） 总结数据显示，与假对照组（黑条）相比，在与（A）相同的条件下，缺血的实质小动脉（灰条）的色调百分比。**与Sham相比，p<0.01。

图4C显示了在这些条件下，对照和缺血动物PA的色调百分比。与第一组实验类似，PA在I/R后的音调较低，但与对照组没有显著差异。来自对照动物的PA对L-NNA的反应增强，但在I/R后对NOS抑制几乎没有反应。然而，两组的小动脉都完全扩张到1.0µM A23187，再次表明EDHF在这些血管中发挥了相当大的作用。有趣的是，阿帕明引起两种类型血管的收缩，但仅部分逆转了基于EDHF的反应，而TRAM-34完全逆转了扩张。值得注意的是，尽管与假对照组相比，TRAM-34在I/R后PA中的百分比基调较低，但这些血管开始时收缩较小，因为它们对L-NNA缺乏反应。然而，TRAM-34也将扩张逆转为这些血管的起始直径。

SK的表达水平钙和IK钙I/R后在MCA和PA中

为了确定MCA和PA对apamin和TRAM-34的不同反应是否是由于SK mRNA表达的差异所致钙和IK钙，我们使用qPCR来比较通道mRNA的表达。图5A显示SK钙和IK钙假手术和缺血动物PA和MCA的表达。请注意，尽管MCA对阿帕明和TRAM-34缺乏反应，但两条血管都表达SK钙和IK钙然而，PA和MCA的表达水平没有显著差异，这表明表达差异不能解释观察到的功能变化。

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SK3基因（SK）的实时定性PCR数据钙通道）和SK4基因（IK钙通道）表达式。（A） 相对于从假对照和缺血脑（仅同侧）分离的大脑中动脉（MCA），实质小动脉（PA）通道表达的变化。（B） 与缺血和再灌注后相比，假对照组的实质小动脉通道表达的变化。（C） IK的比较钙相对于SK的通道表达式钙假手术对照组和缺血再灌注后实质小动脉的通道。

为了确定I/R对PA中apamin和TRAM-34反应的影响是否与通道mRNA表达有关，我们比较了SK的mRNA表达钙和IK钙假控制I/R后(图5B). I/R的通道表达没有差异，再次表明PA对apamin和TRAM-34的不同反应与mRNA表达的差异无关。

最后，由于SK的不同角色钙和IK钙在MCA和PA中介导EDHF的通道中，我们比较了IK的mRNA表达钙相对于SK钙.图5C显示IK增加了4-5倍钙mRNA表达与SK的比较钙未经I/R修改的PA。

讨论

在本研究中，我们首次表明SK钙和IK钙通道参与PA基音的调制，但不参与MCA。阿帕明和TRAM-34，选择性SK的发现证明了这一点钙和IK钙这两种抑制剂均导致PA的色调显著增加，而MCA则不受影响。MCA对这些抑制剂缺乏反应证实了先前的发现。20–22PA基音的增加伴随着通道抑制，这重要地表明，与NO类似，EDHF也影响着PA的基音。第二个主要发现是，虽然I/R显著降低了NO反应性，但对apamin和TRAM-34的反应性仍保持不变。PA中L-NNA收缩减少证实了我们之前的发现5提示I/R后基础NO生成减少。这不可能是由于血管平滑肌对NO（或鸟苷酸环化酶-环GMP途径）的反应性降低，因为I/R后对NO供体硝普钠的敏感性增加。5据推测，EDHF在NO生成受到影响的情况下充当备用血管扩张剂。9,24I/R后NO反应性显著降低，但EDHF的作用保持不变，这一发现似乎与该假设一致。然而，EDHF介导的反应似乎对I/R有抵抗力。

与先前的研究类似，I/R导致MCA的肌源性张力显著丧失，而PA的肌源性张力更为保留。5–7很明显，I/R后MCA的音调降低不是由于SK钙和IK钙因为对这些通道的抑制并没有恢复音调。然而，这一结果有些出乎意料，因为即使在非缺血条件下，MCA对阿帕明和TRAM-34也没有反应。对MCA在基础条件下对apamin和TRAM-34缺乏反应性的解释尚不清楚，但似乎与缺乏通道mRNA表达无关，因为分离MCA中的qPCR显示这两个通道的表达水平与PA相似。因此，在MCA和PA中，EDHF反应的另一组分可能受到不同的影响。EDHF介导反应的基本机制是内皮细胞内钙升高激活SK钙和IK钙导致K的通道+流出和膜超极化。15然后，通过合成或产生能够通过膜或肌内皮缝隙连接扩散的信号，内皮细胞的超极化被转移到血管平滑肌。25在血管平滑肌中，EDHF激活K+-通道，导致超极化和松弛。14,21MCA和PA在这一途径中可能有几个不同的步骤。首先，PA中的基础内皮细胞钙可能高于MCA，因此SK钙和IK钙第二，在基础条件下和/或对激动剂的反应中，负责将超极化从内皮转移到血管平滑肌的信号的产生可能是不同的。第三，MCA和PA之间可能存在解剖学差异，因此信号从内皮传递到血管平滑肌的方式不同。由于其较小的尺寸和较少的平滑肌细胞层，PA的内皮可能对平滑肌有较大的影响。因此，这种结构安排可能允许超极化的转移，而这在MCA的基础条件下是不可能的。

阿帕明和TRAM-34均导致PA收缩的发现表明SK钙和IK钙通道参与调解此响应。在非缺血条件下，对阿帕明的收缩大于对TRAM-34的收缩，这一结果在I/R后被逆转。目前尚不清楚是什么导致了差异反应，或其意义，但根据我们的PCR结果，似乎与通道mRNA表达的差异无关。因为PCR是在含有内皮细胞和血管平滑肌的分离PA上进行的，我们不能排除这些通道在血管平滑肌上表达的可能性。在McNeish等人的研究中。，22MCA免疫组化染色发现IK阳性钙在血管平滑肌中，尽管这些通道在平滑肌中的功能作用尚未被证实。就本研究而言，我们不能排除这些通道在PA的血管平滑肌中表达和/或被I/R改变的可能性，这可能有助于差异反应。

在NOS/COX抑制的情况下刺激内皮细胞钙通常用于研究EDHF反应。5,8,10,13,20先前对肠系膜血管的研究发现，SK和钙和IK钙抑制对于阻断内皮超极化和EDHF是必要的，激活这些通道对激动剂诱导的EDHF的产生至关重要。9,15–17在IK中，大脑动脉被认为与外周血管不同钙仅抑制通道就足以阻止内皮超极化和EDHF介导的舒张。20–22在一项研究中，测量了内皮细胞和血管平滑肌膜电位，以响应内皮细胞刺激，发现SK钙通道可以促进MCA中的内皮依赖性超极化，但仅当动脉能够产生NO时（例如，不存在NOS抑制）。22在本研究中，在NOS/COX抑制的条件下，A23187导致PA扩张，其幅度与罂粟碱和零钙PSS诱导的PA扩张相似，表明EDHF对对照和缺血血管的张力都有重要影响。添加特定密钥钙抑制剂apamin部分逆转了两种血管类型的扩张。这与之前的MCA研究相反，其中阿帕明对EDHF介导的扩张没有影响。20–22然而，与MCA、IK的先前研究类似钙TRAM-34的通道抑制作用完全逆转了两种类型PA的EDHF反应。这些数据表明MCA和PA之间的另一个根本区别是SK似乎参与了这一过程钙PA中介导激动剂诱导的EDHF反应的通道，尽管程度低于IK钙频道。SK的发现钙阿帕明的抑制作用仅部分逆转，而IK钙TRAM-34完全逆转EDHF介导的血管舒张作用可能与PA中通道表达的差异有关钙表达比SK高4-5倍钙在这些容器中。

总结

总之，MCA和穿透性PA的内皮依赖性舒张机制似乎存在根本性差异，包括SK的影响钙和IK钙在PA中，基音和两种通道类型参与激动剂诱导的EDHF介导的舒张，但在MCA中没有。在I/R期间，PA的基调和对压力的反应性相对完整，而MCA的基调与压力反应性显著降低，这一点和其他研究都证明了。5–7I/R后PA中NO反应性也有选择性丧失，但在基础和刺激条件下，EDHF的影响似乎得到了保留。其功能重要性尚不完全清楚，但可能有助于在NOS受到疾病损害的情况下保护CBF。

致谢

我们要感谢医学硕士蒂莫西·亨特（Timothy Hunter）和UVM DNA设施的技术专长，感谢他们对PCR实验的帮助。我们还要感谢Mark T.Nelson博士的有益讨论。

基金:

我们感谢国家神经疾病和中风研究所（向MJC授予NS043316）和托特曼医学研究信托基金的持续支持。

脚注

披露：无。

工具书类

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