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.1997年12月12日;272(50):31515-24.
doi:10.1074/jbc.272.50.31515。

易位在蛋白激酶B活化和功能中的作用

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易位在蛋白激酶B活化和功能中的作用

安杰尔科维奇等。 生物化学杂志. .
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摘要

我们研究了亚细胞定位在蛋白激酶B(PKB)活化调控中的作用。Lck酪氨酸激酶的肉豆蔻酰化/棕榈酰化基序连接到蛋白激酶B的N末端以改变其亚细胞位置。肉豆蔻酰化/棕榈酰化(m/p)-PKBalpha与转染细胞的质膜相关,而野生型激酶主要是细胞溶质。m/p-PKBalpha的活性是未刺激野生型酶的60倍,并且不能被生长因子或磷酸酶抑制剂进一步刺激。体内32P标记和突变表明,m/p-PKBalpha活性是由于Thr308和Ser473上的磷酸化所致,这通常是在用胰岛素或胰岛素样生长因子-1(IGF-1)刺激细胞后在PKB上诱导的。磷酸肌醇3-激酶(PI3-K)的显性阴性形式不影响m/p-PKBalpha活性。m/p-PKBalpha的pleckstrin同源性(PH)结构域对Thr308和Ser473的活化或磷酸化不需要,这表明该结构域可能作为膜靶向模块。与此观点一致,PKBalpha在IGF-1刺激后几分钟内转移到质膜。这种易位需要PH结构域,并且对沃特曼蛋白敏感。我们的结果表明,PKB向质膜的移位需要PI3-K活性,在质膜上,PKB通过胰岛素或IGF-1诱导的相同位点的磷酸化而激活。活化后,激酶从膜上脱落并转移到细胞核。

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