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.1997年3月4日;36(9):2694-700.
doi:10.1021/bi962057x。

TrkB酪氨酸激酶顺反式顺序自磷酸化

附属公司

TrkB酪氨酸激酶顺反式顺序自磷酸化

Y岩崎等。 生物化学. .

摘要

TrkB是生长因子受体酪氨酸激酶家族的一员,通过与脑源性神经营养因子或神经营养素4/5的结合而被激活。利用昆虫细胞表达系统制备了TrkB的细胞内激酶结构域(ICD-TrkB),并对其进行了表征,以确定其自身磷酸化的机制。自磷酸化的时间进程表明ICD-TrkB中存在自磷酸化诱导的活化,它显示出一个缓慢非线性阶段和一个快速线性阶段的双相过程。磷酸化ICD-TrkB的活性明显高于对照组的初始ICD-TrkB,这也支持了这一发现。有趣的是,线性相中的自磷酸化速率明显取决于ICD-TrkB的浓度,而初始自磷酸化的速率与反应混合物中ICD-TrkB的浓度无关。这一观察表明,自磷酸化过程分为两步,首先是分子内活化步骤,然后是分子间活化步骤。结果表明,甘油的加入干扰了分子间的相互作用,仅抑制了自磷酸化的后期,从而证实了这一机理。因此,我们提出ICD-TrkB自磷酸化的机制是顺式/反式磷酸化。

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