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.1997年2月1日;11(3):358-70.
doi:10.1101/gad.11.3.358。

RLF2是酵母染色质组装因子-I的一个亚单位,是体内端粒染色质功能所必需的

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RLF2是酵母染色质组装因子-I的一个亚单位,是体内端粒染色质功能所必需的

S伊诺莫托等。 基因开发. .
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摘要

在酿酒酵母中,端粒重复序列DNA被组装成一种特殊的异染色质样复合物,可以沉默相邻基因的转录。一般DNA结合蛋白Rap1p结合端粒DNA重复序列,有助于端粒长度控制和端粒沉默,是端粒染色质的主要成分。我们在筛选减轻质粒上端粒和着丝粒序列对抗性的基因时,确定了Rap1p定位因子2(RLF2)。在rlf2突变体中,端粒染色质受到干扰:端粒沉默减少,Rap1p定位改变。在野生型细胞中,Rap1p和端粒定位于明亮的核周病灶。在rlf2菌株中,Rap1p病灶数量增加,Rap1-p染色在整个细胞核中更为弥漫,Rap1-病灶分布在更广的核周域,核体积增大50%。尽管Rap1p在rlf2突变细胞中的分布发生了改变,但对端粒下重复序列的荧光原位杂交表明,端粒DNA在野生型和突变细胞中分布相似。因此,在rlf2突变细胞中,Rap1p的分布并不反映端粒DNA的分布。RLF2编码一种带高电荷的线圈蛋白,与人类染色质组装因子-I(hCAF-I)的p150亚单位有显著相似性,该复合物是体外新合成组蛋白核小体DNA复制依赖性组装所需的。此外,RLF2与CAC1相同,CAC1是酵母染色质组装因子-I(yCAF-I)的一个亚基,在体外组装核小体。在野生型细胞中,GAL10启动子表达的表位标记的Rlf2p定位于细胞核,与Rap1p的模式不同,表明Rlf2p不是端粒染色质的组成部分。这项研究提供了证据表明,yCAF-I是体内端粒染色质的功能和组织所必需的。我们认为,Rlf2p促进组蛋白高效及时地组装成端粒染色质。

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