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.1997年2月1日;11(3):345-57.
doi:10.11101/gad.11.3.345。

缺乏染色质组装因子-I的酿酒酵母细胞的紫外线辐射敏感性和端粒沉默的减少

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缺乏染色质组装因子-I的酿酒酵母细胞的紫外线辐射敏感性和端粒沉默的减少

P D考夫曼等。 基因开发. .
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摘要

在体内,聚合酶传代后,新合成的DNA上迅速形成核小体。此前,从人类细胞中分离出一种称为染色质组装因子-I(CAF-I)的蛋白质复合物,该复合物将核小体优先组装到SV40 DNA模板上,并在体外进行复制。使用类似的分析,我们现在报告了从酿酒酵母芽殖酵母中纯化CAF-I。纯化酵母CAF-I的氨基酸序列数据导致在酵母基因组数据库中识别编码每个亚单位的基因。CAC1和CAC2(染色质组装复合体)基因编码的蛋白质分别与人类CAF-I的p150和p60亚单位相似。编码酵母CAF-I(CAC3)p50亚单位的基因与人类p48 CAF-I亚单位相似,之前被鉴定为MSI1,是与多种生物的组蛋白功能相关的WD重复蛋白高度保守亚家族的成员。因此,从酵母到人类细胞,CAF-I在功能和结构上都是保守的。编码CAF-I亚单位的基因(统称为CAC基因)对细胞生存能力不是必需的。然而,任何CAC基因的缺失都会导致对紫外线辐射的敏感性增加,而不会显著增加对γ射线的敏感性。这与之前的生化数据一致,这些数据证明了CAF-I在经历核苷酸切除修复的模板上组装核小体的能力。CAC基因的缺失也能显著减少端粒DNA附近基因的沉默;CAC1基因与RLF2(Rap1p定位因子-2)相同,RLF2是端粒结合Rap1p蛋白在细胞核内正常分布所需的基因。总之,这些数据表明,CAF-I在体内产生染色质结构中发挥作用。

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