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.1997年1月21日;36(3):469-80.
doi:10.1021/bi962069i。

转运中的组蛋白:人细胞核小体组装过程中细胞溶质组蛋白复合物和H4的二乙酰化

附属公司

转运中的组蛋白:人细胞核小体组装过程中细胞溶质组蛋白复合物和H4的二乙酰化

L Chang公司等。 生物化学. .

摘要

检查新生组蛋白在稳定掺入染色质之前的组织和乙酰化。通过HeLa细胞溶质提取物的沉淀和免疫沉淀分析,检测到两种体细胞非核小体组蛋白复合物:一种含有新生的H3和H4,另一种含有与非组蛋白NAP-1相关的H2A(可能还有H2B)。H3/H4复合物的沉降系数为5-6S,与一个或多个护卫蛋白的存在一致。细胞溶质H3/H4复合体中的H4是二乙酰化的,完全符合染色质中新合成H4的乙酰化状态。因此,新生人类H4的二乙酰化在核小体组装之前完成。作为我们对新生H3/H4复合物研究的一部分,还研究了最可能负责新合成H4乙酰化的细胞质组蛋白乙酰转移酶。HeLa组蛋白乙酰转移酶B(HAT B)在体外乙酰化H4,但不乙酰化H3,即使在丁酸钠存在下,最大的二乙酰化H4。人类HAT B乙酰化H4仅在位置5和12的赖氨酸残基上进行,与新生核小体H4高度保守的乙酰化模式完全一致(Sobel等人,1995年),并且具有约100 kDa的天然分子量。基于我们的发现,提出了一个模型,用于组蛋白乙酰化和NAP-1参与体内H2A/H2B沉积和交换,以及核小体组装和染色质重塑。

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