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.1996年9月1日;25(1):1-13.
doi:10.1002/(SICI)1097-0320(19960901)25:1<1::AID-CYTO1>3.0.CO;2-N号。

细胞周期蛋白的细胞计量学

附属公司
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审查

细胞周期蛋白的细胞计数法

Z Darzynkiewicz公司等。 细胞计量学. .
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摘要

细胞周期蛋白是细胞周期进展机制的关键组成部分。它们激活其伴侣细胞周期素依赖性激酶(CDK),并可能将其靶向细胞内各自的底物蛋白。CDK介导的特定蛋白质组的磷酸化驱动细胞通过细胞周期的特定阶段或检查点。在正常细胞未受干扰的生长过程中,几个细胞周期蛋白的表达时间是不连续的,发生在细胞周期的离散和明确的时期。多参数流式细胞术检测细胞周期蛋白与细胞周期位置(DNA含量)的关系为细胞周期研究提供了一种新的方法。与其他方法不同,该方法可用于检测细胞周期蛋白的非计划表达,即G2/M细胞中G1细胞周期蛋白和G1细胞中G2/M周期蛋白的表达,而无需细胞同步。当细胞周期进程停止时,例如,在G1/S边界处通过DNA复制抑制剂同步后,可以看到细胞周期蛋白B1和A的这种非计划表达。在一些肿瘤细胞系中也观察到细胞周期蛋白B1或E的计划外表达,但没有观察到A的计划外表现,即使它们的生长没有受到干扰。同样,虽然细胞周期蛋白D1或D3在非肿瘤细胞中的表达仅限于G1的早期部分,但在许多肿瘤细胞系中也可以在S和G2/M期间看到这些蛋白的表达。这表明伙伴激酶CDK4(在D型细胞周期蛋白激活后磷酸化pRB,使细胞进入S)在这些肿瘤细胞系的整个细胞周期中持续活跃。细胞周期蛋白D的表达也可用于区分G0和G1细胞,并作为活化标记物,识别进入细胞周期的有丝分裂刺激细胞。细胞周期蛋白表达的差异使得区分具有相同DNA含量但位于不同阶段的细胞成为可能,例如DNA倍性较低的G2与M或G2/M细胞与倍性较高的G1细胞。细胞周期蛋白D、E、A和B1的表达提供了新的细胞周期标志,可用于将细胞周期细分为几个不同的亚区。与传统的四个细胞周期相细分相比,许多抗肿瘤药物的细胞周期阻滞点相对于这些间隔可以更准确地估计。然而,后一种应用仅涉及正常细胞或其表型以周期蛋白的预定表达为特征的肿瘤细胞。作为细胞增殖潜能的敏感和特异性指标,细胞周期蛋白,特别是D型细胞周期蛋白,有望成为肿瘤的关键预后标志物。

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