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.1996年5月;119(5):887-97.
doi:10.1093/oxfordjournals.jbchem.A01236。

Wortmann和Li+特异性地抑制大量液体中与网格蛋白无关的内吞内化

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Wortmann和Li+特异性地抑制大量液体中与网格蛋白无关的内吞内化

S B佐藤等。 生物化学杂志. 1996年5月.
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摘要

将人纤维肉瘤细胞系HT-1080培养在含锂(+)的培养基中,可抑制液体标记物辣根过氧化物酶(HRP)的内化80%以上。离子抑制了Ca2+或佛波醇12-肉豆蔻酸酯13-醋酸盐增强的活性。我们还发现,沃特曼(WT)是磷脂酰肌醇(PI)3-激酶(PI 3-k)的一种有效抑制剂,它对非刺激性和两种刺激性内吞作用的抑制程度与Li+相同。相反,WT和Li+均不影响转铁蛋白(Tfn)、EGF或血小板衍生生长因子的早期内化。既不影响靶向早期内体,也不影响一次内化Tfn的再循环。当在无氨氯Na(+)培养基中用25 mM NH4Cl预孵育的细胞追踪细胞质pH值降低时,HT-1080细胞中90%以上的Tfn内化被抑制,而HRP仅降低35%。相反,WT使KB细胞对HRP的摄取减少了34%,而细胞质酸化处理抑制了60%的活性。对其他细胞,即A-549和人类二倍体细胞系Miyajima的比较表明,对WT敏感性较高的细胞对低细胞质pH敏感性较低。这些结果表明,在所有研究的细胞中,本体流体通过网格蛋白非依赖性/PI 3-k依赖性途径或通过网格蛋白依赖性/PI 3-k非依赖性途径内化,尽管它们之间的比率不同。我们还发现,在液相中,针对空泡ATP酶116(100)-kDa亚单位的单克隆抗体内化[OSW2;Sato和Toyama(1994)J.Cell Biol.12739-53]被WT抑制,但抗体仍以表面结合形式内化,大多数抗体被转运到与Tfn受体相关的内体。这些结果表明,这两种内化途径的靶向是相同的早期内吞小室。

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