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.1996年7月26日;271(30):17771-8.
doi:10.1074/jbc.271.30.17771。

低氧诱导因子1的二聚体化、DNA结合和反式激活特性

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低氧诱导因子1的二聚体化、DNA结合和反式激活特性

B H江等。 生物化学杂志. .
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摘要

低氧诱导因子1(HIF-1)是一种异二聚体碱性螺旋-环-螺旋转录因子,调节包括人类促红细胞生成素(EPO)基因在内的低氧诱导基因。在本研究中,我们报告了HIF-1α亚单位的结构特征,这些特征是异源二聚体化、DNA结合和反式激活所必需的。HIF-1α和HIF-1β(ARNT;芳基烃受体核转运体)亚单位从核提取物中共免疫沉淀,表明这些蛋白质在没有DNA的情况下异源二聚体化。在体外翻译的HIF-1α和HIF-1β产生了一种HIF-1/DNA复合物,其电泳迁移率和序列特异性与缺氧细胞核提取物中的HIF-1.类似。与826氨基酸、全长HIF-1α、氨基酸1-166介导的HIF-1β(ARNT)异二聚体相比,氨基酸1-390是最佳DNA结合所必需的。涉及HIF-1α基本结构域的缺失消除了DNA结合,而不影响异二聚体。在共转染分析中,重组HIF-1α和HIF-1β(ARNT)的强制表达激活了包含EPO增强子序列的报告基因的转录,这些报告基因具有完整的HIF-1结合位点,但没有突变。HIF-1α羧基末端(氨基酸391-826)的缺失显著降低了重组HIF-1激活转录的能力。碱性结构域和羧基末端缺失的HIF-1α结构体的过度表达阻断了缺氧细胞中内源性HIF-1对报告基因的激活。

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