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.1995年2月10日;270(6):2447-50.
doi:10.1074/jbc.270.6.2447。

纯化热休克转录因子1的热诱导DNA结合

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纯化热休克转录因子1的热诱导DNA结合

M L Goodson先生等人。 生物化学杂志. .
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摘要

热休克蛋白的热诱导表达,称为细胞应激反应,由热休克转录因子1(HSF1)介导。HSF1以非活性形式存在于未受应力的细胞中,细胞暴露于高温后,HSF1转化为DNA结合。我们开发了一种分离重组小鼠HSF1非DNA结合形式的方案,包括在大肠杆菌中表达HSF1并进行亲和纯化,将其与谷胱甘肽S-转移酶蛋白融合,然后进行特异性蛋白酶裂解以释放纯HSF1蛋白。我们在此报告,纯化的非活性HSF1可以通过体外热处理转化为DNA结合形式。化学交联分析表明,这种转化伴随着HSF1从单体到三聚体天然结构的齐聚,与热休克细胞中观察到的HSF1类似。这些结果表明,存在于HSF1多肽中的元素足以维持该因子与非DNA结合以及热诱导转化为DNA结合形式,并支持HSF1在真核细胞中作为“分子恒温器”的作用,感知不利环境条件并激活细胞应激反应。

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