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.1984年8月10日;259(15):9580-6.

钒酸盐对完整细胞中pp60v-src激酶活性的刺激伴随着酶的一种新的磷酸化状态

  • PMID: 6204986
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钒酸盐对完整细胞中pp60v-src激酶活性的刺激伴随着酶的一种新的磷酸化状态

D J布朗等人。 生物化学杂志. .
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摘要

我们观察到,完整的野生型Rous肉瘤病毒转化的鸡胚成纤维细胞(CEF)与微摩尔原钒酸钠孵育4小时后,根据IgG激酶分析判断,pp60v-src激酶活性增加了2-3倍。将钒酸钠或硫酸钒添加到转化的细胞裂解物或免疫沉淀分析中,对分离的pp60v-src激酶活性没有影响。激酶活性的增加通过pp60v-src(一种36kDa的磷蛋白)的已知底物的磷酸酪氨酸含量的增加在细胞内反映,而细胞蛋白中的总磷酸盐掺入没有变化。[35S]甲硫氨酸的脉冲和脉冲追逐实验表明,pp60v-src的净生物合成或生物合成速率没有变化,这可能是激酶活性升高的原因。随着pp60v-src激酶活性的刺激,我们发现钒酸盐处理后酶的磷酸盐含量和电泳变体的出现平行增加。激酶磷酸化增加是由于磷酸酪氨酸含量增加而磷酸丝氨酸含量没有变化。增加的磷酸酪氨酸含量显示驻留在激酶的羧基末端片段和氨基末端片段中。氨基末端部分中存在的磷酸化酪氨酸可能是从头磷酸化,但也可能代表在没有钒酸盐的非模拟条件下不容易检测到的酪氨酸位点。

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