Temperature-sensitive steps in the transport of secretory proteins through the Golgi complex in exocrine pancreatic cells

doi:10.1073/pnas.83.17.6425

.1986年9月；83(17):6425-9.

doi:10.1073/pnas.83.17.6425。

分泌蛋白通过胰腺外分泌细胞高尔基复合体转运的温度敏感性步骤

J萨拉斯特, GE宫殿, M G Farquhar先生

PMID： 3462704
预防性维修识别码：项目经理386516
内政部： 10.1073/pnas.83.17.6425

分泌蛋白通过胰腺外分泌细胞高尔基复合体转运的温度敏感性步骤

J萨拉斯特等。美国国家科学院程序. 1986年9月.

.1986年9月；83(17):6425-9.

doi:10.1073/pnas.83.17.6425。

作者

J萨拉斯特, G E宫殿, M G Farquhar先生

PMID： 3462704
预防性维修识别码：项目经理386516
内政部： 10.1073/pnas.83.17.6425

摘要

通过大鼠胰腺小叶的细胞分馏，研究温度对分泌蛋白转运的影响，在体外用[35S]蛋氨酸标记脉冲，并在16、20或37℃下追赶60分钟。37℃追赶使分泌蛋白达到酶原颗粒分数，而16或20摄氏度的追逐导致其在总微粒体分数中广泛保留。为了确定转运抑制的位置，总微粒体在蔗糖密度梯度下通过浮选进行亚分馏。共解析出五条谱带，其中最重或B1（密度=1.20 g/ml）主要由粗糙微粒体组成。较轻的组分B2（1.17 g/ml）、B3（1.15 g/ml）和B4（1.14-1.13 g/ml）主要由高尔基元素产生的光滑囊泡组成。B4对半乳糖基转移酶（一种反式高尔基体池标志物）具有最高的特异性活性；假设B2、B3和B4分别代表顺式、中式和跨式高尔基亚区。在2分钟脉冲结束时，标记蛋白的单峰与B1共定位。在随后的60分钟追踪过程中，标记蛋白在16℃时达到B2，在20℃时达到B3。在37℃时，总微粒体部分中剩余的放射性分布在四个峰之间（B1-B4）。结果表明，从内质网到高尔基复合体的转运在20℃以下受到强烈抑制。在16℃时，标记分泌蛋白队列的大部分仍在粗面内质网中，但其前进前沿到达顺式高尔基体元件。在20摄氏度时，前部前进到中间的高尔基体室，在37摄氏度时，大部分队列（约70%）到达凝聚的液泡和酶原颗粒。结论是，沿着内质网-质膜途径的运输步骤具有不同的温度要求。

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