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.2019年12月;4(12):2511-2522.
doi:10.1038/s41564-019-0580-9。 Epub 2019年10月14日。

沙门氏菌3型分泌效应物的BioID筛选揭示了感染期间与液泡定位和稳定性有关的宿主因子

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沙门氏菌3型分泌效应物的BioID筛选揭示了感染期间与液泡定位和稳定性有关的宿主因子

凡妮莎·M·D·科斯塔等。 国家微生物研究所. 2019年12月.

摘要

许多细菌病原体表达毒力蛋白,这些毒力蛋白被转移到宿主细胞(这里称为效应器)中,在那里它们可以与靶蛋白相互作用来操纵宿主细胞过程。这些效应-宿主-蛋白质相互作用在本质上通常是动态的和暂时的,这使得使用传统的基于相互作用的方法难以识别它们。在这里,我们对邻近依赖性生物素标记(BioID)和免疫沉淀结合质谱进行了系统比较,以研究一系列操纵宿主细胞内运输的沙门氏菌3型分泌效应器(SifA、PipB2、SseF、SseG和SopD2)。使用BioID,我们确定了632个候选相互作用与381个独特的人类蛋白质,共同富集在囊泡运输、细胞骨架成分和运输活动中的作用。从BioID专门鉴定的蛋白质子集中,我们报告SifA与BLOC-2相互作用,BLOC-2是一种调节动力蛋白运动活性的蛋白质复合物。我们证明,BLOC-2复合物对于SifA介导的含沙门氏菌液泡定位是必要的,并影响感染期间液泡的稳定性。我们的研究深入了解了沙门氏菌3型分泌型效应器的协同活动,并证明了BioID作为一种强大的辅助工具用于表征效应-宿主蛋白相互作用的效用。

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