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.2014年8月7日:(90):e51789。
doi:10.3791/51789。

血浆或尿液中的水凝胶纳米粒子检测低丰度蛋白质

附属公司

血浆或尿液中的水凝胶纳米粒子检测低丰度蛋白质

鲁本·马格尼等。 J签证费用. .

摘要

新的生物标记物发现在提供更敏感和更特异的疾病检测方面发挥着关键作用。不幸的是,生物流体中存在的许多低丰度生物标记物无法用质谱或免疫分析法轻易检测到,因为它们浓度很低,不稳定,并且常常被高丰度蛋白质(如白蛋白或免疫球蛋白)掩盖。含诱饵的聚N-异丙基丙烯酰胺(NIPAm)纳米颗粒能够克服这些生理障碍。在一个步骤中,他们能够从体液中捕获、浓缩和保存生物标记物。低分子量分析物进入纳米颗粒的核心,并被不同的有机化学染料捕获,这些染料充当高亲和力蛋白质诱饵。纳米颗粒能够将感兴趣的蛋白质浓缩几个数量级。该浓度因子足以增加蛋白质水平,从而使蛋白质处于当前质谱仪、免疫印迹法和免疫分析的检测限内。纳米颗粒可以与过多的生物流体孵育,它们能够大大丰富低分子量蛋白质和肽的浓度,同时排除白蛋白和其他高分子量蛋白质。我们的数据表明,可以实现特定分析物浓度的10000倍放大,使质谱和免疫分析能够检测到以前无法检测到的生物标记物。

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工具书类

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