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.2012年5月;4(5):688-707.
doi:10.3390/v4050688。 Epub 2012年4月27日。

痘病毒细胞进入:它需要多少蛋白质?

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痘病毒细胞进入:它需要多少蛋白质?

伯纳德·莫斯. 病毒. 2012年5月.

摘要

对于许多病毒来说,一种或两种蛋白质能够使细胞结合、膜融合和进入。痘病毒所使用的大量蛋白质是前所未有的,这可能与它们感染广泛细胞的能力有关。痘苗病毒有两种主要的感染形式,一种是原痘病毒:成熟病毒(MV),它有一个单层膜,另一种是细胞外包膜病毒(EV),在融合前有一个额外的外膜被破坏。四种与MV膜相关的病毒蛋白通过与细胞表面的糖胺聚糖或层粘连蛋白结合而促进粘附,而EV粘附蛋白尚未鉴定。大胞饮作用后,可在质膜或酸化的内吞体中进入,涉及肌动蛋白动力学和细胞信号传递。无论是通过何种途径还是MV或EV介导感染,融合都依赖于11到12个大小从4到43kDa不等的非糖基化跨膜蛋白,这些蛋白与复合物相关。这些蛋白在痘病毒中是保守的,因此可能存在一种共同的进入机制。生物化学研究支持一个两步过程,即病毒膜和细胞膜的脂质混合之后是孔扩张和核心穿透。

关键词:内吞作用;大胞饮症;跨膜蛋白;痘苗病毒进入;病毒膜融合。

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数字

图1
图1
感染性病毒的两种主要形式。成熟的病毒粒子(MV)含有80多种蛋白质,由一个被脂膜包围的核蛋白核心组成(黑色)含有大约20种蛋白质。核心中大约有20种蛋白质专门用于信使核糖核酸的合成和修饰。包膜病毒粒子(EV)基本上由带有额外膜的MV组成(红色)含有约6种不同于MV膜的蛋白质。
图2
图2
显示VACV MV与质膜融合的透射电子显微照片(A类)和内涵体膜(B类). 在冷冻切片之前,用MV膜蛋白D8的单克隆抗体对感染细胞进行染色,然后用与金球结合的蛋白a染色。修改自参考文献[25]。
图3
图3
低pH值和内体酸化抑制剂对VACV MV进入的影响。(A类)在4°C下吸附表达萤火虫荧光素酶的重组VACV MV后,在37°C下用缓冲液培养细胞3分钟。然后将细胞与常规培养基在37°C下孵育1 h,裂解并测量荧光素酶活性;(B类)细胞在37°C下用指定浓度的巴非霉素A1预处理50分钟,然后感染MVs,短暂暴露于pH 5或7.4的缓冲液中,荧光素酶活性如图A所示。注意,pH 5下的培养允许在质膜上融合,并绕过抑制剂的作用。修改自参考文献[25]。
图4
图4
膜融合和堆芯进入。将表达萤火虫荧光素酶的R18负载MV与HeLa细胞在4°C培养以允许结合。然后将清洗过的细胞置于含有37°C预加热培养基的试管中,并随时间监测荧光(红线;左y轴)。同时,未标记的MV在低温下与细胞结合,然后转移到37°C。在指定的时间制备细胞裂解物并分析荧光素酶(LUC)活性(紫色线;右y轴)。修改自参考文献[107]。

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引用人

工具书类

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