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.1990年8月;111(2):329-45.
doi:10.1083/jcb.111.2329。

在外分泌胰腺中,基底外侧内吞途径在早期内体之后立即与自噬途径汇合

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在外分泌胰腺中,基底外侧内吞途径在早期内体之后立即与自噬途径汇合

J图兹等。 J细胞生物学. 1990年8月.

摘要

池内颗粒(ICG)是胰腺消化酶和原酶的不溶性聚集体,在外分泌胰腺细胞的粗面内质网内腔内发育,尤其是在豚鼠中。这些ICG通过自噬被消除。根据形态学标准,我们确定了三类不同且连续的自噬细胞,我们称之为吞噬细胞、I型自噬空泡和II型自噬空穴。将豚鼠胰腺小叶在含有HRP的培养基中孵育5-120分钟,以确定内吞和自噬途径之间的关系。在不参与ICG自噬的细胞外周用HRP标记的早期内体孵育15分钟或更少,但在这些短期孵育后,没有一个自噬细胞室HRP阳性。用HRP孵育30分钟后,示踪剂标记了细胞外围的早期内体、中心粒周围区域的晚期内体,以及含有ICG的I型自噬空泡。II型自噬液泡在HRP孵育30分钟后未被标记,但在孵育60-120分钟后被标记。吞噬细胞即使在孵养120分钟后也未接受HRP。我们得出的结论是,自噬和内吞途径在早期内体水平后立即汇合,并且在内吞途径上I型自噬液泡先于II型自噬液泡。我们用组织化学和免疫细胞化学方法研究了酸性磷酸酶、溶酶体蛋白酶和阳离子非依赖性腺苷-6-磷酸受体(CI-M6PR)在三类自噬小室中的分布。吞噬细胞是最早的自噬细胞室,不含任何这些标记物。I型自噬液泡含有酸性磷酸酶,但至多只有极低水平的组织蛋白酶D和CI-M6PR。相比之下,II型自噬液泡富含酸性磷酸酶、组织蛋白酶D和其他溶酶体酶,也富含CI-M6PR。此外,牛CI-M6PR的可溶性片段与胶体金颗粒结合,严重标记II型而非I型自噬液泡,这种标记被甘露糖-6-磷酸特异性阻断。这表明II型自噬液泡中存在的溶酶体酶携带甘露糖-6-磷酸单酯残基。使用3-C2,4-二硝基苯胺-3'-氨基-N-甲基二丙胺(DAMP),我们发现II型自噬液泡呈酸性。我们将这些发现解释为,II型自噬空泡是溶酶体前腔室,其中已经结合的内吞和自噬途径与溶酶体酶的传递途径相遇。

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