Robo1 regulates semaphorin signaling to guide the migration of cortical interneurons through the ventral forebrain

doi:10.1523/JNEUROSCI.5464-10.2011

.2011年4月20日；31(16):6174-87.

doi:10.1523/JNEUROSCI.5464-10.2011。

Robo1调节信号蛋白信号，引导皮层中间神经元通过腹侧前脑的迁移

路易斯·埃尔南德斯·米兰达¹, 安娜·卡里博尼, 克莱尔·福克斯, 克里斯蒂安娜·鲁尔伯格, Jin Hyung Cho（金贤秋）, Jean-François Cloutier公司, 布丽塔·J·艾克霍尔特, 约翰·帕纳维拉斯, 威廉·D·安德鲁斯

附属公司

PMID： 21508241
PMCID公司：下午3088089
内政部： 10.1523/JNEUROSCI.5464-10.2011

Robo1调节信号蛋白信号，引导皮层中间神经元通过腹侧前脑的迁移

路易斯·埃尔南德斯·米兰达等人。神经科学. 2011.

.2011年4月20日；31(16):6174-87.

doi:10.1523/JNEUROSCI.5464-10.2011。

作者

路易斯·埃尔南德斯·米兰达¹, 安娜·卡里博尼, 克莱尔·福克斯, 克里斯蒂安娜·鲁尔伯格, Jin Hyung Cho（金贤秋）, Jean-François Cloutier公司, Britta J艾克霍尔特, 约翰·帕纳维拉斯, 威廉·D·安德鲁斯

附属

¹英国伦敦WC1E 6BT伦敦大学学院细胞与发育生物学系。

PMID： 21508241
PMCID公司：项目经理3088089
内政部： 10.1523/JNEUROSCI.5464-10.2011

摘要

皮质中间神经元主要产生于内侧神经节隆起，在到达皮质的过程中，它们会在大脑皮层下的纹状体周围迁移并避开纹状体的发育。这归因于纹状体外套膜中表达的3类信号蛋白的化学排斥信号，并通过这些细胞中表达的神经胶质（Nrp1和Nrp2）受体发挥作用。皮层中间神经元也表达Robo受体，我们在这里显示，在缺乏Robo1而非Robo2的小鼠中，这些细胞通过纹状体异常迁移。体外实验表明，缺乏Robo1功能的中间神经元对语义蛋白的影响反应显著减弱。对信号蛋白的反应失败似乎归因于这些细胞内Nrp1和PlexinA1受体的减少。生化研究进一步表明，Robo1直接与Nrp1结合，但不与信号素结合，这种相互作用是由其前两个Ig结构域内的一个区域介导的。因此，我们首次表明，Robo1与Nrp1相互作用，调节发育中前脑的信号转导，并引导中间神经元通过皮层下迁移至皮层。

PubMed免责声明

数字

**图1。**
Robo1受体的缺失会增加大脑皮层和纹状体中GABA能神经元的数量。A类,B类，通过大脑的冠状切片*机器人1*^+/−*;GAD67GFP（总距67GFP）*鼠标(A类)和a机器人1^−/−;*GAD67-GFP系列*室友(B类)E15.5处。括号中的区域A类和B类以更高的放大倍数显示C类和D类，而框位于A类和B类以更高的放大倍数显示E类和F类分别是。E′,F′，中的装箱区域E类和F类放大倍率更高。***G公司***，GAD67-GFP+细胞计数显示整个纹状体吻端范围的数量增加*机器人1*^−/−E15.5小鼠。比例尺：A类,B类500微米；***C–F′***，150微米**第页< 0.01. 误差条表示SEM。缩写：CP，皮质板；Cx，大脑皮层；下摆，皮质下摆；IZ，中间带；LV，侧脑室；MZ，边缘带；Sp，隔膜；Str，纹状体；SVZ，室下区；VZ，心室区。

**图2。**
纹状体投射神经元或纹状体中间神经元的数量在*机器人1*^+/−和*机器人1*^−/−胚胎。A类,B类,D类,E类，冠状断面*机器人1*^+/−和*机器人1*^−/−E15.5小鼠(A类,B类)和E18.5处(D类,E类)对FOXP2进行免疫染色。C类,F类，FOXP2+细胞计数在发育纹状体的整个吻-尾区没有差异*机器人1*^−/−和*机器人1*^+/−E15.5的室友(C类)和E18.5(F类).G公司,***H（H）***，冠状脑切片取自*机器人1*^+/−和*机器人1*^−/−E15.5小鼠，由就地杂交*Nkx2.1个*.J型,***K（K）***，类似部分由处理就地杂交*长度x8*.我,***L（左）***，两组动物的标记细胞计数显示，两种基因均无差异。比例尺：A类,B类,D类,E类，100微米；***G公司***,***H（H）***,J型,***K（K）***，120微米。缩写：Str，纹状体。误差条表示SEM。

**图3。**
纹状体投射神经元或中间神经元的数量在*机器人1*^+/−和*机器人1*^−/−成年小鼠。成人冠状脑切片的免疫染色*机器人1*^+/−和*机器人1*^−/−小鼠纹状体投射神经元标记物CB(A类,B类)和DARP-32(D类,E类)和中间神经元标记物PV(***G公司***,***H（H）***)，不锈钢(J型,***K（K）***)和ChAT(***M（M）***,N个). 每个标记的免疫阳性神经元的定量显示在切片附近(C类,F类,我,***L（左）***,***O（运行）***). 比例尺，100μm。缩写：Str，Striatum；WM，白质。误差条表示SEM。

**图4。**
纹状体中CB+细胞数量增加*机器人1*^−/−小鼠胚胎。冠状切片的免疫染色*机器人1*^+/−和*机器人1*^−/−E15.5处CB的大脑(A类,B类)，E18.5(D类,E类)、和P0(***G公司***,***H（H）***). 纹状体CB+细胞数量的定量*机器人1*^−/−动物和*机器人1*^+/−每个年龄段的室友都显示在该路段附近(C类,F类,我）。比例尺，100μm*第页< 0.05; **第页< 0.01. 缩写：Str，Striatum。误差条表示SEM。

**图5。**
纹状体中CB+或FOXP2+细胞数量无差异*机器人2*^−/−,*狭缝1*^−/−*;狭缝2*^−/−老鼠和控制室友。A类,B类,D类,E类，取大脑冠状切片*机器人2*^+/+(A类,D类)和*机器人2*^−/−(B类,E类)对E15.5小鼠进行FOXP2免疫染色(A类,B类)和CB(D类,E类).C类,F类，定量E15.5纹状体中FOXP2+和CB+细胞的数量。***G公司***,***H（H）***,J型,***K（K）***，大脑冠状切片狭缝^+/−*;狭缝2*^+/−(***G公司***,J型)和*狭缝1*^−/−*;狭缝2*^−/−(***H（H）***,***K（K）***)对E15.5小鼠进行FOXP2免疫染色(***G公司***,***H（H）***)和CB(J型,***K（K）***).我,***L（左）***，定量E15.5纹状体中FOXP2+和CB+细胞的数量。比例尺，100μm**第页< 0.01. 缩写：Str，Striatum。误差条表示SEM。

**图6。**
MGE衍生的细胞来自*机器人1*^−/−突变体对Sema3A或Sema3F没有反应。***A–D***，细胞从E13.5 MGE外植体中迁移*机器人1*^+/−(A类,C类)和机器人1^−/−(B类,D类)用对照条件培养基（CM-myc）处理的窝友(A类,B类)或CM-Sema3A(C类,D类).E类,F类，迁移的量化*机器人1*^+/−和*机器人1*^−/−Sema3A处理的MGE外植体(E类)或Sema3F(F类).G公司,***H（H）***，量化分离的MGE细胞数量*机器人1*^+/−和*机器人1*^−/−博伊登小室试验中用于测试小鼠对Sema3A的反应的小鼠(***G公司***)或Sema3F(***H（H）***). 比例尺，100μm**第页< 0.01; ***第页< 0.001. 误差条表示SEM。

**图7。**
GN11细胞表达Robo受体并对3类语义蛋白和Slit1作出反应。A类，逆转录-PCR分析显示Robo1–3在GN11细胞中表达。B类，免疫组织化学证实了Robo受体在GN11细胞中的表达。C类,D类，在含有Sema3A、Sema3F、Slit1或对照（CM-myc）条件培养基的Boyden室中定量GN11细胞迁移(C类).D类Robo1-DNA转染的GN11细胞对Sema3A的反应不如对照（GFP）转染的细胞。比例尺，100μm***第页< 0.001. 误差条表示SEM。

**图8。**
MGE细胞中Nrp和PlexinA的下调*机器人1*^−/−*;GAD67-GFP系列*小鼠和Robo1-DNA转染的GN11细胞。A类,B类，Sema3A和Sema3F不与Robo1结合。用myc标记的全长Plexin、Nrp或Robo1瞬时转染并在培养基中用Flag标记的Sema3F处理的COS-7细胞的细胞裂解物用抗myc抗体免疫沉淀，并用抗Flag和抗myc抗体免疫印迹(A类).B类将Sema3A-AP或Sema3F-AP添加到瞬时转染全长Nrp1、Nrp2、Robo1或对照的COS-7细胞中。Sema3A仅与表达Nrp1的细胞结合，Sema3F仅与表达Nrp2的细胞结合；未观察到与表达Robo1的细胞结合。C类对转染Robo1-DN或对照（GFP）构建物的GN11细胞和E15.5衍生的MGE细胞进行信号蛋白受体QPCR机器人1^+/−*;GAD67-GFP系列*和*机器人1*^−/−*;GAD67-GFP系列*老鼠。D类来自E15.5的MGE细胞的免疫印迹分析*机器人1*^+/−*;GAD67-GFP系列*和*机器人1*^−/−*;GAD67-GFP系列*小鼠和转染Robo1-DN细胞的GN11细胞的Nrp1和PlexinA1水平降低，但Nrp2水平没有降低。缩写：−RT，无逆转录酶（阴性对照）。所检测的基因列在凝胶带旁边。E类，在E15.5的MGE衍生细胞上对VEGF受体进行QPCR机器人1^+/−*;GAD67-GFP系列*和*机器人1*^−/−*;GAD67-GFP系列*老鼠。所检测的基因列在凝胶带旁边。在两组动物的MGE细胞中均观察到VEGF受体缺乏表达，但在全脑提取物中都存在。

**图9。**
Robo1直接与Nrp1交互。A类对E15.5脑裂解物进行免疫沉淀，并用所示抗体进行免疫印迹；请注意，Robo1与Robo2、Nrp1、Nrp2和PlexinA1形成复合物，但与VEGFR3无关。B类用Fc-标记的Nrp1或Robo1免疫沉淀COS-7细胞的细胞裂解物，并用抗myc抗体免疫印迹。Robo1亲同性结合自身，亲异性结合Nrp1。C类Covasphere聚集分析以确定Robo1的异嗜性相互作用。在聚集试验结束时，用25倍物镜对涂有所示Fc蛋白的珠进行成像。柱状图显示了珠子（红色、绿色和黄色）比例随时间的相应变化；异亲相互作用用黄色表示。Robo1似乎与自身亲同性结合，与Nrp1亲异性结合，但与Nrp2或Sema3A无关。D类用相同的Fc标记蛋白免疫沉淀COS-7细胞的细胞裂解物，并用抗myc抗体免疫印迹COS-7的细胞裂解产物，这些细胞瞬时转染myc标记的全长Nrp1并在培养基中与Robo1-Fc、Robo1Δ1,2-Fc或Robo1△3,4,5-Fc孵育。Robo1Δ1,2-Fc未能协同免疫沉淀Nrp1，这表明神经胶质结合域位于Robo1的前两个Ig域内。E类使用Nrp-Fc（绿色）和Robo1-Fc、Robo1Δ1,2-Fc和Robo1△3,4,5-Fc（红色）进行的Covasphere聚集分析证实了这些发现。误差条表示SEM。

请参阅PMC中的此图像和版权信息

类似文章

信号素3A-neuropilin1信号传导参与皮层中间神经元的生成。
Andrews WD、Barber M、Nemitz M、Memi F、Parnavelas JG。 Andrews WD等人。脑结构功能。2017年7月；222(5):2217-2233. doi:10.1007/s00429-016-1337-3。Epub 2016年11月17日。脑结构功能。2017 PMID：27858201 免费PMC文章。
PlexinA1突变小鼠神经元祖细胞增殖能力的改变。
Andrews WD、Davidson K、Tamamaki N、Ruhrberg C、Parnavelas JG。 Andrews WD等人。《计算机神经学杂志》。2016年2月15日；524(3):518-34. doi:10.1002/cne.23806。Epub 2015年7月1日。《计算机神经学杂志》。2016 PMID：25975775 免费PMC文章。
皮质发育过程中的Slit-Robo交互。
Andrews WD、Barber M、Parnavelas JG。 Andrews WD等人。 J Anat杂志。2007年8月；211(2):188-98. doi:10.1111/j.1469-7580.2007.00750.x.Epub 2007年6月6日。 J Anat杂志。2007 PMID：17553100 免费PMC文章。审查。
Robo1调节前脑主要轴突束的发育和中间神经元的迁移。
Andrews W、Liapi A、Plachez C、Camurri L、Zhang J、Mori S、Murakami F、Parnavelas JG、Sundaresan V、Richards LJ。 Andrews W等人。发展。2006年6月；133(11):2243-52. doi:10.1242/dev.02379。发展。2006 PMID：16690755
神经磷脂-1和神经磷脂-2与VEGF酪氨酸激酶受体的相互作用。
Neufeld G、Kessler O、Herzog Y。 Neufeld G等人。高级实验医学生物。2002;515:81-90. doi:10.1007/978-1-4615-0119-0_7。高级实验医学生物。2002 PMID：12613545 审查。

查看所有类似文章

引用人

分子标记的鉴定确定了诱导的脊髓和颅骨运动神经元的差异蛋白质稳态反应。
Fiore APZP、Maity S、Jeffery L、An D、Rendleman J、Iannitelli D、Choi H、Mazzoni E、Vogel C。 Fiore APZP等人。 Cell Rep.2024年3月26日；43(3):113885. doi:10.1016/j.celrep.2024.113885。Epub 2024年3月7日。细胞报告2024。 PMID：38457337 免费PMC文章。
神经系统发育调节因子Neuropilin-1作为脑癌潜在的预后标记物和治疗靶点。
Rodrigues EM、Giovanni AF、Ribas CAPM、Malafaia O、Roesler R、Isolan GR。罗德里格斯EM等人。癌症（巴塞尔）。2023年10月10日；15(20):4922. doi:10.3390/cancers15204922。癌症（巴塞尔）。2023 PMID：37894289 免费PMC文章。审查。
中间神经元奥德赛：切向迁移的分子机制。
Toudji I、Toumi A、Chamberland E、Rossignol E。 Toudji I等人。前神经电路。2023年9月14日；17:1256455. doi:10.3389/fncir.2023.1256455。eCollection 2023年。前神经电路。2023 PMID：37779671 免费PMC文章。审查。
信号素4D诱导牙髓干细胞的血管生成分化。
Al Turkestani N，Zhang Z，Nör JE。 Al Turkestani N等人。 Dent J（巴塞尔）。2023年6月27日；11(7):160. doi:10.3390/dj11070160。 Dent J（巴塞尔）。2023 PMID：37504226 免费PMC文章。
皮层中间神经元的起源、发展和突触发生。
Llorca A，Deogracias R。 Llorca A等人。前神经科学。2022年6月27日；16:929469. doi:10.3389/fnins.2022.929469。2022年电子采集。前神经科学。2022 PMID：35833090 免费PMC文章。审查。

查看所有“引用者”文章

工具书类

1. Andrews W、Liapi A、Plachez C、Camurri L、Zhang J、Mori S、Murakami F、Parnavelas JG、Sundaresan V、Richards LJ。Robo1调节前脑主要轴突束的发育和中间神经元的迁移。发展。2006;133:2243–2252.-公共医学
1. Andrews W、Barber M、Hernandez-Miranda LR、Xian J、Rakic S、Sundaresan V、Rabbitts TH、Pannell R、Rabbitets P、Thompson H、Erskine L、Murakami F、Parnavelas JG。Slit-Robo信号在皮层中间神经元的生成、迁移和形态分化中的作用。开发生物。2008;313:648–658.-公共医学
1. Barber M、Di Meglio T、Andrews WD、Hernández-Miranda LR、Murakami F、Chédotal A、Parnavelas JG。Robo3在皮层中间神经元发育中的作用。大脑皮层。2009;19（补充1）：i22–i31。-项目管理咨询公司-公共医学
1. Camurri L、Mambetisaeva E、Sundaresan V.Rig-1是Robo家族基因的新成员，在小鼠发育过程中表现出不同的表达模式。基因表达模式。2004;4:99–103.-公共医学
1. Camurri L、Mambetisaeva E、Davies D、Parnavelas J、Sundaresan V、Andrews W。存在两种具有不同生化特性的Robo3亚型的证据。分子细胞神经科学。2005;30:485–493.-公共医学

出版物类型

行动

MeSH术语

行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动

物质

行动
行动
行动
行动
行动

赠款和资金

LinkOut-更多资源

[1] Andrews W、Liapi A、Plachez C、Camurri L、Zhang J、Mori S、Murakami F、Parnavelas JG、Sundaresan V、Richards LJ。Robo1调节前脑主要轴突束的发育和中间神经元的迁移。发展。2006;133:2243–2252.-公共医学

[2] Andrews W、Liapi A、Plachez C、Camurri L、Zhang J、Mori S、Murakami F、Parnavelas JG、Sundaresan V、Richards LJ。Robo1调节前脑主要轴突束的发育和中间神经元的迁移。发展。2006;133:2243–2252.-公共医学

[3] Andrews W、Barber M、Hernandez-Miranda LR、Xian J、Rakic S、Sundaresan V、Rabbitts TH、Pannell R、Rabbitets P、Thompson H、Erskine L、Murakami F、Parnavelas JG。Slit-Robo信号在皮层中间神经元的生成、迁移和形态分化中的作用。开发生物。2008;313:648–658.-公共医学

[4] Andrews W、Barber M、Hernandez-Miranda LR、Xian J、Rakic S、Sundaresan V、Rabbitts TH、Pannell R、Rabbitets P、Thompson H、Erskine L、Murakami F、Parnavelas JG。Slit-Robo信号在皮层中间神经元的生成、迁移和形态分化中的作用。开发生物。2008;313:648–658.-公共医学

[5] Barber M、Di Meglio T、Andrews WD、Hernández-Miranda LR、Murakami F、Chédotal A、Parnavelas JG。Robo3在皮层中间神经元发育中的作用。大脑皮层。2009;19（补充1）：i22–i31。-项目管理咨询公司-公共医学

[6] Barber M、Di Meglio T、Andrews WD、Hernández-Miranda LR、Murakami F、Chédotal A、Parnavelas JG。Robo3在皮层中间神经元发育中的作用。大脑皮层。2009;19（补充1）：i22–i31。-项目管理咨询公司-公共医学

[7] Camurri L、Mambetisaeva E、Sundaresan V.Rig-1是Robo家族基因的新成员，在小鼠发育过程中表现出不同的表达模式。基因表达模式。2004;4:99–103.-公共医学

[8] Camurri L、Mambetisaeva E、Sundaresan V.Rig-1是Robo家族基因的新成员，在小鼠发育过程中表现出不同的表达模式。基因表达模式。2004;4:99–103.-公共医学

[9] Camurri L、Mambetisaeva E、Davies D、Parnavelas J、Sundaresan V、Andrews W。存在两种具有不同生化特性的Robo3亚型的证据。分子细胞神经科学。2005;30:485–493.-公共医学

[10] Camurri L、Mambetisaeva E、Davies D、Parnavelas J、Sundaresan V、Andrews W。存在两种具有不同生化特性的Robo3亚型的证据。分子细胞神经科学。2005;30:485–493.-公共医学

将引文保存到文件

电子邮件引文

添加到集合

添加到我的书目

您保存的搜索

为外部引文管理软件创建文件

您的RSS源

Robo1调节信号蛋白信号，引导皮层中间神经元通过腹侧前脑的迁移

附属

Robo1调节信号蛋白信号，引导皮层中间神经元通过腹侧前脑的迁移

作者

附属

摘要

数字

类似文章

引用人

工具书类

出版物类型

MeSH术语

物质

赠款和资金

LinkOut-更多资源

全文源

分子生物学数据库

研究材料

其他

摘要

数字

类似文章

引用人

工具书类

出版物类型

MeSH术语

物质

相关信息

赠款和资金

LinkOut-更多资源

全文源

分子生物学数据库

研究材料

其他