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.2010年9月21日；107(38):16703-8.
doi:10.1073/pnas.1006233107。 Epub 2010年9月7日。

用病毒受体配体桥蛋白选择性病毒载体转导体内表达ErbB4的皮层中间神经元

崔继元（Jiwon Choi） 1, 约翰·A·T·杨, 爱德华·M·卡拉威
附属机构

用病毒受体结合桥蛋白在体内选择性转导表达ErbB4的皮层中间神经元

崔继元（Jiwon Choi）等人。 美国国家科学院程序. .

摘要

将病毒载体感染导向特定的细胞类型，对疾病的治疗和复杂组织的基础研究都会受益。我们使用独特的细胞靶向方法将病毒载体转导至表达神经调节蛋白（NRG）受体ErbB4的大脑皮层神经元；NRG和ErbB4都与精神分裂症有关，而已知大脑皮层中ErbB5的表达仅限于抑制性神经元。我们发现，由禽病毒受体TVB与NRG融合而成的桥接蛋白，以及EnvB假型病毒，能够选择性地将感染导向体内表达ErbB4的抑制性皮层神经元。有趣的是，尽管ErbB4在广泛的皮层抑制细胞类型中表达，但NRG依赖性感染仅限于更具选择性的抑制细胞类型亚群。这些结果证明了一种工具，可用于进一步研究脑回路中的NRG和ErbB受体，并证明了进一步开发相关桥蛋白以靶向复杂组织中其他特定细胞类型的基因表达的可行性。

PubMed免责声明

利益冲突声明

作者声明没有利益冲突。

数字

图1。
图1。
感染EnvB假型狂犬病病毒和NRG1-TVB桥蛋白后，皮层神经元表达GFP。(A类)低倍镜显示感染GFP标记神经元的整体位置和形态。珊瑚表面位于顶部。(B类)与相同A类用DAPI复染（蓝色）显示皮质层。照片顶部第1层的边界显示为L1。(C类——F类)高倍镜显示皮质板神经元更详细的形态学特征(C类和D类)和第1层(E类和F类). 请注意，所有表达GFP的细胞都是黏液性和非锥状的。（比例尺：A类和B类150微米；C类和E类，75微米）条形图输入C类也适用于D类.Bar输入E类也适用于F类.
图2。
图2。
GFP表达的双标记和ErbB4原位杂交。GFP表明细胞感染了EnvB假型病毒和TVB–NRG1桥蛋白，并用热变性抗GFP抗体染色。用ErbB4反义RNA探针标记后，黑色反应产物显示抗地高辛染色。(A类——C类)显示GFP阳性细胞分布的低倍视图(A类)，ErbB4原位标记(B类)、和覆盖(C类). 许多GFP阳性细胞也呈ErbB4阳性。ErbB4阳性细胞用方框标记(B类,C类,E类，以及F类)，并且可以看到所有GFP阳性细胞在覆盖物中被双重标记(C类). 在某些情况下，表达GFP的细胞也没有明显的ErbB4标记(D类——F类，圆圈单元格）或明显未标记(G公司——我，圆圈单元格）。（比例尺：A类，50μm，对应于A类——C类;F类，50μm，对应于D类——F类;我，50μm，对应于G公司——我.)
图3。
图3。
感染EnvB假型狂犬病病毒和TVB–NRG1桥接蛋白后，皮层神经元表达mCherry，该桥接蛋白在皮层抑制神经元中表达GFP。(A类)低倍视图显示感染的mCherry标记神经元的整体位置和形态。珊瑚表面位于顶部。(B类)与相同的部分A类图示GAD-67 GFP敲除小鼠系中表达GFP的抑制神经元。(C类)的覆盖A类和B类显示有许多双标记（黄色/橙色）细胞。双标记细胞用方框标记，而表达mCherry但不表达GFP的细胞用圆圈标记(D类——F类). (D类——F类)皮质板（第1层外）中单（圆形细胞）和双标记细胞（装箱）的高倍视图。（比例尺：A类，75μm，对应于A类——C类;D类，75μm，对应于D类——F类.)
图4。
图4。
GFP表达和抑制细胞类型特异性标记物的双重标记。绿色标签表示感染了EnvB假分型病毒和TVB–NRG1桥蛋白的细胞的抗GFP染色，而红色标签表示针对CR的抗体染色(A类——C类)或PV(D类——F类). GFP表达A类和D类图示了感染的GFP标记神经元的整体位置和形态。珊瑚表面位于顶部。B类和E类对应于其左侧的相同部分，并用防CR标记红色标签(B类)或PV(E类).C类和F类是GFP和抗体染色图像的叠加。一些双标签单元格用箭头标记。请注意，GFP表达细胞被标记为CR是常见的，而用PV标记的细胞则很少（选中的照片突出显示在这种细胞上）。（比例尺：A类，100μm，对应于所有图像。）
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