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.2010:26:397-419.
doi:10.1146/annurev-cellbio-100109-104020。

纤维连接蛋白细胞外基质的组装

附属公司
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纤维连接蛋白细胞外基质的组装

普瓦·辛格等。 年收入细胞开发生物. 2010.

摘要

在基质组装过程中,多价细胞外基质(ECM)蛋白被诱导自结合并与其他ECM蛋白相互作用形成纤维网络。基质组装通常由与细胞表面受体结合的ECM糖蛋白启动,例如纤维连接蛋白(FN)二聚体与α5ß1整合素结合。受体结合刺激由N末端组装域介导的FN自结合,并组织肌动蛋白细胞骨架以促进细胞收缩。FN构象变化暴露出参与原纤维形成和将原纤维转化为稳定、不溶形式的额外结合位点。一旦组装,FN基质通过促进其他ECM蛋白的组装来影响组织组织。在这里,我们描述了将FN二聚体组装成纤维基质的主要步骤、分子相互作用和细胞机制,同时强调了需要进一步研究的重要问题。

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图1
图1
纤维连接蛋白(FN)亚单位图。每个FN亚基由三种类型的重复组成:I型(六角形),II型(广场)和III型(圆柱). 基于旋转阴影电子显微镜图像,FN的两个亚单位被弯曲,其轮廓与此图中的形状相似(Engel等人,1981年)。启动程序集所需的域(红色)包括细胞结合域(III中的RGD位点10+III中的协同位点9),N端组装域(I1–5)和C末端的分子间二聚半胱氨酸。70-kDa碎片从I延伸1通过I9包括组装和胶原/明胶结合域。第三代1–2领域(红色带条纹)有两个FN结合位点,参与促进组装的构象变化。其他FN结合位点位于III4–5域和III中12–14/也与肝素和合成癸烷结合的庚二结构域。或者,拼接的额外域EIIIA、EIIIB和可变区域(V)以白色显示。
图2
图2
纤维连接蛋白(FN)纤维基质包围培养细胞。HT1080细胞在玻璃盖玻片上生长20小时,培养基中添加0.1μM地塞米松和25μg ml−1Brenner等人(2000年)所述的大鼠血浆FN。细胞固定并用抗FN单克隆抗体(IC3)染色,然后用荧光标记的山羊抗鼠免疫球蛋白G染色。图像显示FN纤维(绿色)细胞核呈4′,6-二氨基-2-苯基吲哚(DAPI)染色的细胞周围(蓝色).
图3
图3
纤维连接蛋白(FN)基质组装的主要步骤。整合素诱导致密FN向延伸原纤维的转化分四步进行。()紧密的FN二聚体与整合素结合(灰色). 单个二聚体的FN亚单位以两种橙色阴影显示。(b条)细胞内蛋白质(粉红色,黄色的,蓝色)被招募到整合素细胞质域并连接到肌动蛋白细胞骨架(绿色). 细胞骨架连接增加细胞收缩力(箭头),诱导FN的构象变化。(c(c))整合素聚集和暴露的FN-binding位点促进FN-FN相互作用并进一步改变FN构象。()最后,这些事件触发了稳定的不溶性纤维基质的形成(红色盒子)显示FN二聚体的单个亚基之间的相互作用。N表示FN亚单位的N末端。纤维通过()FN二聚体的端到端关联,由N-末端组装结构域介导,然后是(ii(ii))可能涉及III中其他FN结合位点的纤维间的横向联系1–2,III类4–5、和III12–14灰色X代表纤维之间的相互作用。
图4
图4
HT1080细胞在纤维纤维连接蛋白(FN)基质上的迁移。提取高度融合的成纤维细胞培养物用于制备无细胞纤维基质,其中FN是主要蛋白成分。将HT1080人纤维肉瘤细胞在无血清培养基中粘附到基质上2小时。然后将胎牛血清添加到培养基中,使其最终浓度达到10%,以开始迁移。要观看迁移过程,请参阅补充视频1,该视频最初发表于Mao&Schwarzbauer(2006)。
图5
图5
未来的问题。纤维连接蛋白(FN)基质组装的基本步骤用绿色方框标出。其他蛋白质、相互作用、过程和机制(蓝色)可能会影响矩阵组装的各个步骤,如图所示(蓝色虚线箭头). 需要进行额外调查以了解其影响。ECM,细胞外基质。

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引用人

参考文献

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