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.2009年3月;50补遗A(0 0):A49-54。
doi:10.1269/jrr.08132s。

微束辐照秀丽线虫

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微束辐照秀丽线虫

安东内拉·贝图奇等。 J辐射研究. 2009年3月.

摘要

生物系统中复杂辐射反应的理解,例如旁观者反应所代表的非靶向效应,可以通过使用遗传适应性模型生物来加强。迄今为止,几乎所有的旁观者研究都是使用传统的单细胞体外系统进行的,这些系统是表征基本细胞和分子反应的有用工具。在单层外植体中已有一些研究报道,在三维正常人体组织系统中也研究了旁观者反应。然而,尽管体外模型众所周知是有用的,但它们无法捕捉到诸如动物模型等生命系统辐射反应的复杂性。为了对旁观者效应进行体内研究,我们开发了一种利用质子微束暴露活生物体的新技术。我们报告了使用线虫线虫株和绿色荧光蛋白(GFP)报告基因hsp-4热休克基因作为体内辐射研究模型。动物暴露在高温和化学应激源下会导致全身hsp-4蛋白增加,这反映在荧光增强上。我们在此报告,γ射线也能以剂量依赖的方式诱导应激反应。然而,全身暴露于应激因子不允许评估非靶向组织中的距离依赖性反应:即所谓的旁观者效应。我们使用RARAF微束将3 MeV质子定位到幼虫尾部的一个位置。24小时后,GFP的表达在距离照射部位>100微米处以数量依赖的方式增强。

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图1
图1
a)年轻孕妇秀丽线虫使用Normarski光学元件对SJ4005应变进行成像。b)同一蠕虫的荧光图像。可见GFP的基础表达定位于咽部(P)、受精囊(S)和尾部(T)。
图2
图2
GFP在秀丽线虫γ射线照射后的SJ4005菌株。图像中的蠕虫具有相同的方向:右边是咽部,左边是尾巴。答:。显示基本GFP表达的控制蠕虫。B。虫子暴露于3 Gyγ射线后,其基础GFP表达略有增加。箭头表示照射后检测到明显的GFP过度表达。C、。接触10 Gyγ射线的蠕虫表现出广泛的GFP过度表达,主要位于后肠和咽部。
图3
图3
hsp-4::GFP压力响应秀丽线虫微束辐照24小时后尾流。a)控制。b)用25个粒子辐照蜗杆尾部。未检测到压力反应。c–d)微束辐照50和75个质子后的应激反应。在距离照射区域150μm的后肠中可以看到强烈的应激反应。比例尺指示50μm。黑色恒星表示有1μm质子束照射的区域。

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