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.2009:452:13-23.
doi:10.1016/S0076-6879(08)03602-1。

用GFP-LC3转基因小鼠监测自噬的方法

附属公司

用GFP-LC3转基因小鼠监测自噬的方法

Noboru水岛. 酶学方法. 2009.

摘要

现在有几种方法可用于监测自噬。虽然生物方法对培养细胞和均质组织有用,但这些方法不适合测定异质组织中每种细胞类型的自噬活性。此外,自噬体的细胞内定位常常提供有价值的信息。因此,形态学分析在许多研究中仍然很重要。尽管电子显微镜已经成为金标准,但最近对自噬分子机制的研究已经导致了几种自噬体标记蛋白的开发,其中应用最广泛的是LC3,它是Atg8的哺乳动物同源物。这些标记蛋白允许通过荧光显微镜鉴定自噬结构。通过产生绿色荧光蛋白(GFP)-LC3转基因小鼠,该方法已应用于整个动物。本章描述了使用GFP-LC3转基因小鼠模型的该方法的背景和实用性,以及应用该方法时可能的注意事项。

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