Immunohistochemical validation of multiple phospho-specific epitopes for estrogen receptor alpha (ERalpha) in tissue microarrays of ERalpha positive human breast carcinomas

doi:10.1007/s10549-008-0267-z

.2009年12月；118(3):443-53.

doi:10.1007/s10549-008-0267-z。 Epub 2008年12月23日。

雌激素受体α阳性乳腺癌组织芯片中雌激素受体α（ERalpha）多个磷酸特异性表位的免疫组织化学验证

乔治·P·斯克利里斯¹, 布莱恩·罗恩, 玛丽亚姆·哈赫里, 克里斯托弗·威廉姆斯, 沙地鳟鱼, 萨内拉·贝吉奇, 米歇尔·帕里辛, 彼得·华生, 利·墨菲

附属公司

PMID： 19104930
预防性维修识别码：项目经理3448371
内政部： 10.1007/s10549-008-0267-z

雌激素受体α阳性乳腺癌组织芯片中雌激素受体α（ERalpha）多个磷酸特异性表位的免疫组织化学验证

乔治·P·斯克利里斯等。乳腺癌研究治疗. 2009年12月.

.2009年12月；118(3):443-53.

doi:10.1007/s10549-008-0267-z。 Epub 2008年12月23日。

作者

乔治·P·斯克利里斯¹, 布莱恩·罗恩, 玛丽亚姆·哈赫里, 克里斯托弗·威廉姆斯, Sandy鳟鱼, 萨内拉·贝吉奇, 米歇尔·帕里辛, 彼得·华生, 利·墨菲

附属

¹加拿大曼尼托巴大学医学院生物化学和医学遗传学系，地址：加拿大温尼伯市麦克德莫特大道675号，邮编：R3E 0V9。

PMID： 19104930
预防性维修识别码：项目经理3448371
内政部： 10.1007/s10549-008-0267-z

摘要

雌激素受体α（ERalpha）活性由几个位点的磷酸化调节。最近，几种针对ERalpha内个别磷酸化位点的抗体已经可用。这些抗体可能为深入研究磷酸化ERalpha在人体乳腺肿瘤中的相关性提供了宝贵的工具。然而，首先需要对这些抗体进行免疫组织化学验证。在本研究中，我们研究了ERalpha内特定磷酸化位点产生的几种抗体在福尔马林固定石蜡包埋人乳腺癌活检标本免疫组织化学中的作用。此外，这些数据首次证明，在乳腺癌中检测到多种磷酸化ERalpha形式（P-S104/106-ERalpha、P-S118-ERapha、P-S167-ERalpha、P-S282-ERalpha、P-S294-ERalpah、P-T311-ERalpha和P-S559-ERalpha）这表明磷酸化ERalpha亚型的分析可能有助于选择内分泌治疗有益的乳腺癌患者亚组。

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数字

图1
代表性人类浸润性乳腺癌活检中P-S167-ERα和P-S104/106-ERα磷酸化抗体的免疫组织化学验证。按照“方法”中的描述进行IHC。用P-S167-ERα多克隆抗体（Cat#BL1643，Montgomery，TX，USA）染色的乳腺肿瘤切片，核表达强(一). 使用预先吸收了30倍磷酸化肽的P-S167-ERα抗体的同一肿瘤的相邻部分(b条)或非磷酸化ERα肽(**c（c）**)或在T311磷酸化的肽(d日). 用P-S104/106-ERα多克隆抗体（Cat#BL1636，Montgomery，TX，USA）孵育的乳腺肿瘤切片显示特异性核表达(**e（电子）**). 使用预先吸收了30倍磷酸化肽的P-S104/106-ERα抗体预孵育同一肿瘤的相邻部分(**（f）**)或非磷酸化ERα肽(克)或Ser 305磷酸化的肽(小时). 所有放大倍数×1250

图2
ERα阴性（LBA和IHC阴性）乳腺肿瘤切片中磷酸特异性ERα阴性染色的示例。一肿瘤#12091用P-S118-ERα抗体染色；b条肿瘤#15933，P-S118-ERα抗体染色；**c（c）**肿瘤#11317用P-S118-ERα抗体染色；d日肿瘤#12091用P-S167-ERα抗体染色；**e（电子）**肿瘤#15933，P-S167-ERα抗体染色；**（f）**肿瘤#111317用P-S167-ERα抗体染色；克用P-T311-ERα抗体染色的肿瘤#12304；小时肿瘤#11317用P-T311-ERα抗体染色；我肿瘤#12773用P-S559-ERα抗体染色；j个肿瘤#12304用P-S282-ERα抗体染色；k个肿瘤#12091用P-S294-ERα抗体染色；我肿瘤#12304用P-S559-ERα抗体染色。所有放大倍数×1250

图3
代表性人类浸润性乳腺癌活检中P-T311-ERα和P-S559-ERα磷酸化抗体的免疫组织化学验证。按照“方法”中的描述进行IHC。ER+乳腺肿瘤切片用核表达强的P-T311-ERα多克隆抗体染色(一). 使用预先吸收了30倍磷酸化肽的P-T311-ERα抗体的同一肿瘤的相邻部分(b条)或非磷酸化ERα肽(**c（c）**). 用P-S559-ERα多克隆抗体孵育的乳腺肿瘤切片显示特异性核表达(d日). 使用预先吸收的P-S559-ERα抗体与30倍过量的磷酸化肽预孵育同一肿瘤的相邻部分(**e（电子）**)或非磷酸化ERα肽(**（f）**). 所有放大倍数×500

图4
代表性人类浸润性乳腺癌活检中P-S294-ERα和P-S282-ERα磷酸化抗体的免疫组织化学验证。按照“方法”中的描述进行IHC。用核表达强的P-S294-ERα多克隆抗体染色的ER+乳腺肿瘤切片(一). 使用预先吸收了30倍磷酸化肽的P-S294-ERα抗体的同一肿瘤的相邻部分(b条)或非磷酸化ERα肽(**c（c）**). 用P-S282-ERα多克隆抗体孵育的乳腺肿瘤切片显示特异性核表达(d日). 使用预先吸收了30倍磷酸化肽的P-S282-ERα抗体预孵育同一肿瘤的相邻部分(**e（电子）**)或非磷酸化ERα肽(**（f）**). 所有放大倍数×500

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