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.2008年5月;294(5):F1116-28。
doi:10.1152/ajprenal.00142.2007。 Epub 2008年3月12日。

MKL1介导TGF-β1诱导人肾上皮细胞α-平滑肌肌动蛋白表达

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MKL1介导TGF-β1诱导人肾上皮细胞α-平滑肌肌动蛋白表达

杰拉德·埃尔伯格等。 美国生理学杂志肾脏生理学. 2008年5月.
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摘要

已知转化生长因子-β1(TGF-β1)可诱导肾脏上皮-间质转化,这是一个与肾小管间质纤维化有关的过程。我们假设血清反应因子(SRF)的辅激活物巨核细胞白血病因子-1(MKL1)在肾小管上皮细胞(RTC)原代培养物中刺激α-平滑肌肌动蛋白(alpha-SMA)转录,经TGF-β1治疗后,该肌动蛋白转化为肌成纤维细胞。在此,我们研究了MKL1表达对这些细胞中α-SMA的影响。我们证明TGF-β1刺激α-SMA转录是通过已知与SRF结合的富含CC(A/T)(6)的GG元件介导的。这些元素还介导MKL1效应,该效应在无血清培养基中显著激活α-SMA转录。与绿色荧光蛋白融合的MKL1定位于细胞核并诱导α-SMA表达,而不考虑TGF-β1的治疗。使用蛋白酶体抑制剂,我们还证明蛋白水解酶泛素途径调节MKL1的表达。这些数据表明,MKL1过度表达足以诱导α-SMA表达。小干扰RNA对MKL1内源性表达的抑制消除了TGF-β1对α-SMA表达的刺激。因此,MKL1也是TGF-β1刺激α-SMA表达所必需的。Western blot和免疫荧光分析表明,过度表达的内源性MKL1位于非刺激性RTC的细胞核内。染色质免疫沉淀分析表明TGF-beta1诱导内源性SRF和MKL1与染色质中的α-SMA启动子结合。由于MKL1是一种调节α-SMA表达的有效因子,因此内源性MKL2表达或活性的调节可能会对肾脏中肌成纤维细胞的形成和功能产生深远影响。

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