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.2008年2月;4(2):205-13.
doi:10.4161/auto.5331。 Epub 2007年11月21日。

Rosella:一种荧光pH-生物传感器,用于报告酵母细胞液和细胞器的液泡周转

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Rosella:一种荧光pH-生物传感器,用于报告酵母细胞液和细胞器的液泡周转

卡洛斯·罗萨多等。 自噬. 2008年2月.

摘要

我们开发了一种使用Rosella监测自噬的方法,Rosella是一种生物传感器,由快速成熟的pH-稳定红色荧光蛋白与pH-敏感绿色荧光蛋白变体融合而成。它的作用方式取决于不同细胞室和液泡之间的pH值差异。在这里,我们通过在胞浆中表达并靶向线粒体或细胞核来证明其在酵母(酿酒酵母)中的用途。当细胞在贫氮培养基中培养时,观察到标记有生物传感器的细胞室(即胞浆、线粒体或细胞核)被吸收到液泡中。我们表明,对于细胞质和线粒体来说,这种空泡摄取是一个依赖ATG8的过程,而在缺乏Atg8p的情况下,细胞核的摄取显著减少,可以说是部分依赖ATG8-。我们通过对经历自噬的离散细胞群进行荧光激活的细胞分选,进一步证明了生物传感器作为自噬报告基因的价值。

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