跳到主页面内容
美国国旗

美国政府的官方网站

Dot政府

gov意味着它是官方的。
联邦政府网站通常以.gov或.mil结尾。之前分享敏感信息，确保你在联邦政府政府网站。

Https系统

该站点是安全的。
这个https（https）：//确保您连接到官方网站，并且您提供的任何信息都是加密的并安全传输。

访问密钥 NCBI主页 MyNCBI主页 主要内容 主导航
.2007年10月10日10:4:25。
doi:10.1186/1742-2094-4-25。

白藜芦醇能有效降低脂多糖激活的大鼠原代小胶质细胞中前列腺素E2的生成和自由基的形成

爱德华多·坎德拉里奥·贾利尔 1, 安东尼奥·皮涅罗·德·奥利维拉, Sybill Gräf, 哈沙兰·巴蒂亚, 迈克尔·休尔, 爱德华多·穆尼奥斯, 伯恩德·菲比奇
附属公司

白藜芦醇能有效降低脂多糖激活的大鼠原代小胶质细胞中前列腺素E2的生成和自由基的形成

爱德华多·坎德拉里奥·贾利勒等。 J神经炎症. .

摘要

背景：神经炎症反应由不同的伦理学触发，可以产生有益或有害的结果。小胶质细胞是参与神经炎症的主要细胞类型，释放多种介质，导致包括脑缺血和神经退行性疾病在内的多种疾病中的神经元死亡。研究表明，小胶质细胞活化减弱可以保护大脑免受不同类型的损伤。最近的证据表明，白藜芦醇具有抗炎和有效的抗氧化特性。研究还表明，白藜芦醇是环氧合酶（COX）-1活性的有效抑制剂。先前的研究表明，该化合物能够在体内外不同模型中减少神经元损伤。本研究的目的是检测白藜芦醇是否能够通过脂多糖（LPS）激活的大鼠原代小胶质细胞减少前列腺素E2（PGE2）和8-异前列腺素F2α（8-iso-PGF2α）的生成。

方法：从新生大鼠大脑皮层制备原代小胶质细胞培养物。在存在或不存在不同浓度的白藜芦醇（1-50μM）的情况下，用10ng/ml的LPS刺激微神经胶质细胞。培养24小时后，收集培养基，用酶免疫分析法测量PGE2和8-iso-PGF2α的产生。与LPS孵育24小时后，通过Western blotting研究COX-1、COX-2和微粒体前列腺素E合成酶-1（mPGES-1）的蛋白水平。采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）分析研究mPGES-1在mRNA水平的表达。

结果：我们的结果表明，白藜芦醇能有效地减少LPS诱导的PGE2合成和8-iso-PGF2α的形成，这是自由基生成的一种测量方法。有趣的是，白藜芦醇剂量依赖性地降低了mPGES-1的表达（mRNA和蛋白），mPGES1是负责活化小胶质细胞合成PGE2的关键酶，而白藜芦醇不影响COX-2的表达。因此，白藜芦醇是第一个已知的抑制剂，它可以在不影响COX-2水平的情况下特异性地阻止mPGES-1的表达。本研究的另一个重要观察结果是，其他COX-1选择性抑制剂（SC-560和水杨酸戊酰酯）有效降低LPS激活的小胶质细胞产生PGE2和8-iso-PGF2α。

结论：这些发现表明，天然存在的多酚白藜芦醇能够减少小胶质细胞的激活，这一作用可能有助于解释其在几种脑损伤体内模型中的神经保护作用。

PubMed免责声明

数字

图1
图1
答：白藜芦醇剂量依赖性抑制LPS诱导的PGE2大鼠原代小胶质细胞的产生。B类：Trolox C和α-生育酚对前列腺素E的影响2小胶质细胞产生LPS。PGE的数量2与LPS孵育24小时后，用酶免疫分析法测定培养基中的含量。在用LPS刺激细胞前30分钟添加物质。每列和误差条代表4个独立实验的平均值±标准误差。星号表示处理之间的显著差异*LPS控制的p<0.05、**p<0.01和***p<0.001（单向方差分析，然后是学生-纽曼-凯尔斯事后的，事后的测试）。
图2
图2
白藜芦醇处理可抑制小胶质细胞中的环氧合酶酶活性。用于COX-1活性分析(A类)，不处理细胞，添加不同浓度的白藜芦醇15分钟。在此培养时间后，添加15μM花生四烯酸和PGE215分钟后测量。对于总COX活性测定（COX-1+COX-2），细胞要么未经处理，要么用LPS（10 ng/ml）刺激24小时。去除培养基后，用不同浓度的白藜芦醇处理细胞30分钟，不加或加15μM花生四烯酸。前列腺素E2按照材料和方法中的描述，通过酶免疫分析测定上清液中的含量。数据表示为平均值±S.E.M.使用单向方差分析进行统计分析，然后使用Student-Newman-Keuls事后的，事后的测试*未经治疗的对照组（不含白藜芦醇）p<0.05和**p<0.01。
图3
图3
答：显示COX-1、COX-2、mPGES-1和β-actin mRNA的RT-PCR产物的代表性显微照片。在没有或存在不同浓度白藜芦醇的情况下，用LPS（10 ng/ml）处理小胶质细胞。对每种情况的mRNA表达水平进行测试。在所有条件下都可以观察到COX-1mRNA的组成型表达。然而，未经处理的小胶质细胞中未检测到COX-2和mPGES-1，而在LPS存在下，它们的表达显著增加。白藜芦醇治疗显著降低mPGES-1的表达，但不降低COX-2的表达。与LPS孵育4小时后进行RT-PCR分析。在LPS前30分钟向培养物中添加白藜芦醇。B类：白藜芦醇对mPGES-1表达影响的半定量分析。该分析是根据4个独立进行的不同RT-PCR实验的结果进行的。大鼠β-肌动蛋白的相对表达用于正常化。PCR产物的扩增子大小出现在每个转录物的名称下方*未经治疗的LPS对照组p<0.05和**p<0.01。
图4
图4
答：免疫印迹分析不同浓度白藜芦醇（1-50μM）处理的LPS激活的小胶质细胞中COX-1、COX-2、mPGES-1和肌动蛋白水平。与LPS孵育24小时后制备小胶质蛋白提取物，并进行SDS-PAGE，然后使用每个蛋白的特定抗体进行免疫印迹分析。B类：根据肌动蛋白负荷控制标准化的mPGES-1和COX-2蛋白表达的定量密度分析。白藜芦醇能有效降低LPS诱导的mPGES-1蛋白表达*未经治疗的LPS对照组p<0.05和**p<0.01。条形图表示4个独立实验的平均值±标准误差。
图5
图5
答：白藜芦醇对8-国际标准化组织-前列腺素F2α(8-国际标准化组织-前列腺素F2α)10 ng/ml LPS下的产量。8-国际标准化组织-前列腺素F2α在用LPS单独或与给定浓度的白藜芦醇联合刺激小胶质细胞24小时后，在培养基中测定。B类：LPS介导的中度减少8-国际标准化组织-前列腺素F2α由抗氧化剂Trolox C和α-生育酚形成*单就LPS而言，p<0.05、**p<0.01和***p<0.001。对于两个面板，直方图表示4个独立实验的平均值±S.E.M。采用单因素方差分析（ANOVA）和Student-Newman-Keuls进行统计分析事后的，事后的测试。
图6
图6
有效抑制LPS诱导的PGE2(A类和C类)和8-国际标准化组织-前列腺素F2α形成(B类和D类)通过两种高选择性COX-1抑制剂（SC-560和VAS）。用抑制剂预先刺激30分钟后，将LPS（10 ng/mL）添加到培养基中，并将PGE的量2和8-国际标准化组织-前列腺素F2α在与LPS孵育24小时后使用特异性酶免疫测定法进行测定。对于所有面板，直方图表示4个独立实验的平均值±S.E.M。采用单因素方差分析（ANOVA）和Student-Newman-Keuls进行统计分析事后的，事后的测试*LPS对照组的p<0.05、**p<0.01和***p<0.001。
图7
图7
答：抗氧化剂Trolox C和COX-1抑制剂（SC-560和VAS）对LPS刺激的大鼠小胶质细胞中COX-1、COX-2和mPGES-1 mRNA表达的影响。与LPS孵育4小时后进行RT-PCR分析。如面板所示的半定量分析所示，COX-1抑制剂对mPGES-1表达没有显著影响B类Trolox C使mPGES-1表达中度降低，但未达到统计学意义。利用3个独立进行的不同RT-PCR实验的结果进行半定量分析。大鼠S12的相对表达用于归一化。
请参阅PMC中的此图像和版权信息

类似文章

查看所有类似文章

引用人

查看所有“被引用”文章

工具书类

    1. Soleas GJ、Diamandis EP、Goldberg DM。白藜芦醇：一种时机已经到来的分子？然后就走了？临床生物化学。1997;30:91–113. doi:10.1016/S0009-9120（96）00155-5。-内政部-公共医学
    1. Fremont L.白藜芦醇的生物效应。生命科学。2000;66:663–673. doi:10.1016/S0024-3205（99）00410-5。-内政部-公共医学
    1. Gusman J，Malone H，Atassi G.对白藜芦醇潜在的化学预防和化学治疗特性的重新评估。致癌。2001;22:1111–1117. doi:10.1093/carcin/22.8.1111。-内政部-公共医学
    1. Gao X，Xu YX，Janakiraman N，Chapman RA，Gautam SC。白藜芦醇的免疫调节活性：抑制淋巴细胞增殖，发展细胞介导的细胞毒性和细胞因子产生。生物化学药理学。2001;62:1299–1308. doi:10.1016/S0006-2952（01）00775-4。-内政部-公共医学
    1. Gao X，Deeb D，Media J，Divine G，Jiang H，Chapman RA，Gautam SC。白藜芦醇的免疫调节活性：体内外免疫效应的差异。生物化学药理学。2003;66:2427–2435. doi:10.1016/j.bcp.2003.08.008。-内政部-公共医学

出版物类型

MeSH术语