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.2007年11月2日;282(44):32280-7.
doi:10.1074/jbc。M704150200。 Epub 2007年9月11日。

胰岛素刺激的谷氨酸转位需要Akt与APPL1的相互作用

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胰岛素刺激的谷氨酸转位需要Akt与APPL1的相互作用

斋藤津一等。 生物化学杂志. .
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摘要

APPL1(包含PH域、PTB域和亮氨酸拉链基序1的衔接蛋白)是一种Akt/蛋白激酶B结合蛋白,参与各种受体(包括受体酪氨酸激酶)的信号转导和膜转运途径。在这里,我们建立了APPL1在胰岛素信号传导中的作用,通过联合免疫沉淀和下拉分析证明了其与Akt2的相互作用。在原代大鼠脂肪细胞和骨骼肌中,APPL1和Akt2形成复合物,在两个组织中的胰岛素刺激后分离。为了研究脂肪细胞中APPL1的可能功能,我们在小干扰和短发夹RNA敲低APPL1后,通过免疫荧光分析Akt磷酸化、2-脱氧葡萄糖摄取和谷氨酸转位。我们发现APPL1基因敲除抑制了Akt磷酸化、葡萄糖摄取和谷氨酸转位。我们还测试了3T3-L1脂肪细胞表达全长APPL1或N端或C端APPL1结构的效果。有趣的是,全长APPL1及其N末端的表达抑制了胰岛素刺激的2-脱氧葡萄糖摄取和谷氨酸转位,抑制程度大致相同(40-60%)。我们通过细胞分馏证实,转染全长APPL1的3T3-L1脂肪细胞中谷氨酸转位被严重阻断。通过细胞分馏,APPL1主要定位于胞浆中,在胰岛素的作用下,它对轻微粒体和细胞核表现出轻微的重新定域。通过免疫荧光,我们还显示APPL1与谷氨酸4部分共定位。这些数据表明,APPL1在肌肉和脂肪组织中胰岛素刺激的谷氨酸转位中起着重要作用,其N末端部分可能对APPL1功能至关重要。

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