UXT (Ubiquitously Expressed Transcript) causes mitochondrial aggregation

doi:10.1007/s11626-007-9016-6

.2007年3月至4月；43(3-4):139-46.

doi:10.1007/s11626-007-9016-6。 Epub 2007年3月21日。

UXT（普遍表达的转录本）导致线粒体聚集

蒂华纳·N·摩斯¹, 艾米·沃伊, 华莱士·L·麦基汉, 刘乐源

附属公司

PMID： 17554592
预防性维修识别码： PMC3229262型
内政部： 2007年10月17日/11626-007-9016-6

UXT（普遍表达的转录本）导致线粒体聚集

蒂华纳N苔等。体外细胞开发生物动画. 2007年3月至4月.

.2007年3月至4月；43(3-4):139-46.

doi:10.1007/s11626-007-9016-6。 Epub 2007年3月21日。

作者

蒂华纳·N·摩斯¹, 艾米·沃伊, 华莱士·L·麦基汉, 刘乐源

附属

¹德克萨斯州A&M健康科学中心生物科学与技术研究所癌症和干细胞生物学中心，德克萨斯州医疗中心，休斯顿，德克萨斯州77030，美国。

PMID： 17554592
预防性维修识别码：下午3229262
内政部： 2007年10月17日/11626-007-9016-6

摘要

线粒体是真核细胞的生物能量和代谢中心，在细胞凋亡中起着重要作用。线粒体分布受微管细胞骨架控制。线粒体的核周聚集是某些类型细胞死亡的特征之一。对线粒体聚集的控制，特别是与细胞死亡事件有关的控制，还知之甚少。此前，我们确定普遍表达的转录物（UXT）是线粒体相关LRPPRC的潜在成分，LRPPRC是一种多域组织，可能将线粒体和微管细胞骨架与染色体重塑结合在一起。这里我们显示，当在哺乳动物细胞中过度表达时，绿色荧光蛋白标记的UXT（GFP-UXT）显示出四种类型的分布模式，它们与蛋白质水平成比例，并随时间增加。UXT最初分散在核外细胞溶质中，然后出现在点状细胞溶质点中，随后出现强烈的核周聚集，最终侵入并破坏细胞核。GFP-UXT的点状细胞溶质聚集物与线粒体和LRPPRC的聚集物一致。我们的结论是，UXT浓度的增加可能通过UXT与LRPPRC的结合促进线粒体的渐进聚集和细胞死亡。

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数字

图1
GFP-UXT的细胞分布。(一)转染细胞提取物中GFP-UXT或GFP的免疫印迹表明表达产物完整。(b条)转染GFP-UXT的COS7细胞中GFP分布的四种一般形态学特征。根据核周聚集强度的增加，细胞被分为I型至IV型。(*c（c）*)转染GFP载体的细胞。正常细胞中GFP的一般胞浆和核分布(*顶部面板*). 传统的凋亡细胞显示出一个浓缩但完整的细胞核和其中的GFP。细胞边界通过光学显微镜定位，并如图所示进行追踪。酒吧所有显微照片中均为10μm。

图2
(一)显示GFP-UXT核周聚集的III型和IV型细胞的时间依赖性增加。(b条)如图1所示的常规凋亡细胞*c（c）*仅表达GFP。数据是三个独立实验的平均值+SD，其中至少有1000个转染的III型和IV型细胞或凋亡细胞被计数。

图3
GFP-UXT和线粒体聚集体的染色。绿色GFP(一),红色线粒体MitoTracker染色(b条)、和蓝色DAPI染色细胞核(*c（c）*)在中合并(d日). 黄色表示UXT与线粒体重叠，绿色表示GFP与核DNA重叠。

图4
哺乳动物细胞中UXT与LRPPRC和BUB3的相互作用。将转染HA-UXT或仅转染HA的COS7细胞裂解，并用固定在蛋白G琼脂糖微球上的抗HA单克隆抗体进行免疫沉淀。使用LRPPRC、BUB3或HA抗体对沉淀的复合物进行免疫印迹分析，如左边.斑点代表5×10的裂解物^三细胞。还指出了未转染的细胞裂解物。全细胞裂解物总量；HAIP，免疫沉淀与HA抗体。

图5
UXT和LRPPRC的彩色化。用LRPPRC抗体分析转染GFP-UXT或GFP的细胞。绿色GFP(一)，红色LRPPRC(b条)和蓝色DAPI（DNA）(*c（c）*)在中合并(d日). 黄色表示UXT和LRPPRC重叠。

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