跳到主页内容
美国国旗

美国政府的官方网站

Dot政府

gov意味着它是官方的。
联邦政府网站通常以.gov或.mil结尾。之前分享敏感信息，确保你在联邦政府政府网站。

Https系统

该站点是安全的。
这个https（https）：//确保您连接到官方网站，并且您提供的任何信息都是加密的并安全传输。

访问密钥 NCBI主页 MyNCBI主页 主要内容 主导航
。2006年10月17日；103(42):15392-7.
doi:10.1073/pnas.0607313103。 Epub 2006年10月4日。

作为组蛋白H3赖氨酸4甲基转移酶靶基因特异性决定簇的辅活化因子

Seunghee Lee（李承熙） 1, 李东基, 鸭梨豆, Jeongkyung Lee（李正庆）, 博拉·李, 尤妮·夸克, 孔永云, 李秀京（Soo-Kyung Lee）, 罗伯特·G·罗德, Jae W Lee（李在伟）
附属公司

作为组蛋白H3赖氨酸4甲基转移酶靶基因特异性决定簇的辅活化因子

Seunghee Lee（李承熙）等。 美国国家科学院程序。 。

摘要

激活信号协整因子-2（ASC-2）是包括维甲酸受体（RAR）在内的多种转录因子的辅激活因子，与混合白血病中的组蛋白H3-K4甲基转移酶（H3K4MTs）MLL3和MLL4相关。在这里，我们表明表达MLL3 SET域突变体的小鼠与等基因ASC2+/-小鼠具有相同的表型，并且RAR靶基因RAR-beta2在ASC2-null小鼠胚胎成纤维细胞（MEF）或表达针对MLL3和MLL4的siRNA的MEF中的表达和H3-K4三甲基化受损。我们还发现，MLL3和MLL4存在于不同的ASC-2复合物中，而不是常见的ASC-2复合体中，并且它们被ASC-2招募到RAR-beta2中。相反，RAR-beta2在缺乏美宁（MLL1和MLL2 H3K4MT复合物的成分）的MEF中表达完整。这些结果表明，ASC-2对MLL3和MLL4 H3K4MT复合物具有靶基因特异性，H3K4MT对其靶基因的招募通常涉及H3K4 MT复合物的整体成分与转录因子之间的相互作用。

PubMed免责声明

利益冲突声明

作者声明没有利益冲突

数字

图1。
图1。
的生成MLL3级Δ/Δ老鼠。(A类)野生型（wt）和目标MLL3级基因座以loxP位点示意图显示(实心三角形)新霉素抗性基因两侧有两个Frt位点。外显子25和26编码61个氨基酸，其中包括RYINHS基序，该基序有助于SET结构域的催化核心区域。指出了Southern印迹探针和PCR引物的基因组位置。(B类)重组蛋白的Southern blot分析MLL3级轨迹。代表性克隆（克隆12）从BglII和NcoI限制性消化中分别产生5.5 kb和4.4 kb的靶向位置特异性条带。(C类)在基因组PCR中，引物a/b为靶基因产生650 bp的带MLL3级野生型的基因座和2100-bp带MLL3级轨迹。引物c/d只能从野生型中产生350-bp的带MLL3级轨迹。(D类)在RT-PCR中，引物e/f对野生型和靶向MLL3 mRNA都产生265-bp的带，而引物g/h对野生型MLL3 m RNA产生356-bp带，对靶向MLL 3 mRNA产生172-bp带。星号表示引物。
图2。
图2。
MLL3和ASC-2在遗传水平上的相似性。(A类)87 P14的基因型。(B类)死亡E13.5的代表性图片MLL3级Δ/Δ胚胎（箭头）。(C类)2周龄代表MLL3级Δ/Δ眼睛睁开迟缓的老鼠（箭头）及其野生型室友。(D类)4周龄代表MLL3级Δ/Δ生长发育迟缓的老鼠和它的野生型同胞一起出现。(E类)体重MLL3级Δ/Δ(n个=3）小鼠及其野生型同胞(n个=4）超过60天。(F类)一万个野生型和MLL3级Δ/ΔMEF播种在9厘米内2连续6天每天采集细胞并计数。显示了一个具有代表性的结果。
图3。
图3。
MLL3级Δ/ΔMEF支持RAR交易。(A类)野生型和MLL3级Δ/Δ用MLL3、ASC-2和β-肌动蛋白抗体以及用重组MLL3蛋白或BSA预孵育的MLL3抗体对小鼠进行免疫印迹（IB）（数据未显示）。(B类)在Q-PCR中，在E12.5野生型和MLL3级Δ/ΔMEF公司。(C类)E12.5野生型和MLL3级Δ/Δ用IgG和ASC-2抗体检测MEF，然后用MLL3抗体进行免疫印迹。(D类)E9.5野生型（wt），MLL3级Δ/Δ、和ASC-2型−/−MEF用载体或0.1μM 9处理-顺式-用Q-PCR检测12 h的维甲酸（RA）和RAR-β2转录水平。(E类)E9.5野生型和ASC-2型−/−用β2-RARE-Luc报告子和增加数量的ASC-2表达载体转染MEF；然后用溶媒或0.1μM 9处理-顺式-RA治疗12小时，检测荧光素酶活性。(F类)对HeLa细胞的核提取物进行IgG和MLL4s和MLL3抗体免疫沉淀，然后用所示抗体进行免疫印迹（4）。
图4。
图4。
ASC-2是依赖RAR招募MLL3和MLL4的关键适配器。(A类)用抗MLL3或MLL4s的siRNA和CMV-GFP转染HEK293细胞。在转染后3天，对这些细胞进行MLL3、MLL4s和ASC-2的免疫染色。监测GFP阳性细胞（即转染细胞；箭头）MLL3、MLL4s和ASC-2的表达。(B类)用对照siRNA、针对MLL3或MLL4s的siRNA或针对MLL4和MLL4的siRNA转染HEK293细胞。转染后两天，用载体或0.1μM 9处理细胞-顺式-RA（9-RA）持续12小时，然后通过Q-PCR检测RAR-β2转录水平。(C类)对HeLa细胞的核提取物进行IgG和ASC-2抗体免疫沉淀（IP），然后用ASC-2和WDR5抗体免疫印迹。(D类)用对照（con）siRNA或抗WDR5或RbBP5的siRNA转染HEK293细胞。转染后两天，用载体或0.1μM 9处理细胞-顺式-RA治疗12小时，并通过Q-PCR检测RAR-β2和GAPDH（对照；数据未显示）转录物。(E类)来自野生型（wt）和ASC-2型−/−MEFs用0.1μM 9处理-顺式-RA持续0-45分钟，并接受带有MLL3和MLL4抗体的ChIP。
图5。
图5。
风险调整比率-β2H3-K4三甲基化需要ASC-2和MLL3或MLL4。(A类)E9.5野生型（wt），MLL3级Δ/Δ、和ASC-2型−/−MEF在使用载体或0.1μM 9治疗期间接受了H3-K4三甲基化和H3/H4乙酰化的ChIP分析-顺式-RA（9RA）持续2小时(B类)用载体或0.1μM 9处理转染对照（con）siRNA或MLL4s和MLL3的siRNA的HepG2细胞-顺式-转染后2天RA 2小时，然后对其进行ChIPs进行H3-K4三甲基化。(C类)用载体或0.1μM 9处理转染了WDR5或RbBP5的对照siRNA或siRNA的HepG2细胞-顺式-RA转染后2 h，2天，然后对其进行ChIPs，以进行H3-K4三甲基化风险调整比率-β2这些siRNAs对H3-K4三甲基化GAPDH公司（未显示数据）。(D类)E9.5野生型和ASC-2型−/−MEF以及来源于野生型和美宁−/−MEF，用载体或0.1μM 9处理-顺式-RA持续12小时，9-顺式-采用RT-PCR检测RA诱导RAR-β2 mRNA的表达。
请参阅PMC中的此图像和版权信息

类似文章

查看所有类似文章

引用人

  • KMT2D通过T细胞调节活化、定位和整合素表达。
    Potter SJ、Zhang L、Kotliar M、Wu Y、Schafer C、Stefan K、Boukas L、Qu'd d、Bodamer O、Simpson BN、Barski A、Lindsley AW、Bjornsson HT。 Potter SJ等人。 前免疫。2024年5月3日；15:1341745. doi:10.3389/fimmu.2024.1341745。eCollection 2024年。 前免疫。2024 PMID：38765012 免费PMC文章。
  • KMT2C中一个新的11碱基对缺失导致Kleefstra综合征2。
    Whitford W、Taylor J、Hayes I、Smith W、Snell RG、Lehnert K、Jacobsen JC。 Whitford W等人。 分子遗传学基因组医学，2024年1月；12（1）：e2350。doi:10.1002/mgg3.2350。Epub 2023年12月26日。 分子遗传学基因组医学。2024。 PMID：38146907 免费PMC文章。
  • 全基因组关联筛查确定男性生育维持中的外围因素。
    Greither T、Behre HM、Herlyn H。 Greither T等人。 国际分子科学杂志。2022年12月28日；24(1):524. doi:10.3390/ijms24010524。 国际分子科学杂志。2022 PMID：36613967 免费PMC文章。
  • 染色质修饰复合物在膀胱癌中的作用和治疗机会。
    Meghani K、Folgosa Cooley L、Piunti A、Meeks JJ。 Meghani K等人。 膀胱癌。2022年6月3日；8(2):101-112. doi:10.3233/BLC-211609。2022年电子采集。 膀胱癌。2022 PMID：35898580 免费PMC文章。 审查。
  • 生物钟功能不需要组蛋白甲基转移酶MLL3。
    Baxter M、Poolman T、Cunningham P、Hunter L、Voronkov M、Kitchen GB、Goosey L、Begley N、Kay D、Hespe A、Maidstone R、Loudon ASI、Ray DW。 Baxter M等人。 FASEB J.2022年7月；36（7）：e22356。doi:10.1096/fj.202200368R。 FASEB J.2022。 PMID：35704036 免费PMC文章。
查看所有“被引用”文章

工具书类

    1. Mangelsdorf DJ、Thummel C、Beato M、Herrlich P、Schutz G、Umesono K、Blumberg B、Kastner P、Mark M、Chambon P等。Cell。1995;83:835–839.-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Hermanson O，Glass CK，Rosenfeld MG.内分泌代谢趋势。2002;13:55–60.-公共医学
    1. Mahajan MA，Samuels HH。Endocr Rev.2005；26:583–597.-公共医学
    1. Goo YH、Sohn YC、Kim DH、Kim SW、Kang MJ、Jung DJ、Kwak E、Barlev NA、Berger SL、Chow VT等。分子细胞生物学。2003;23:140–149.-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Xiao B，Wilson JR，Gamblin SJ，《当前手术结构生物学》。2003;13:699–705.-公共医学

出版物类型

MeSH术语