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.2006年8月;5(8):1412-25.
doi:10.1074/mcp。M600066-MCP200。 Epub 2006年5月2日。

绿藻莱茵衣藻光合膜的环境调节磷酸蛋白质组

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绿藻莱茵衣藻光合膜的环境调节磷酸蛋白质组

玛丽亚·图尔金纳等。 分子细胞蛋白质组学. 2006年8月.
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摘要

绿藻莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)光合膜体内蛋白质磷酸化位点的定位显示,磷酸化的主要环境依赖性变化聚集在光系统II(PSII)核心与其捕光触角(LHCII)之间的界面。从海藻细胞中分离出来的光合膜暴露在四种不同的影响光合作用的环境条件下:(i)暗需氧,对应于光合状态1;(ii)在氮气氛下变暗,对应于光合状态2;(iii)中等亮度;和(iv)强光。用胰蛋白酶将表面暴露的磷酸化肽从膜上裂解,甲基酯化,用固定化金属亲和色谱富集,并用纳米四极杆飞行时间质谱进行序列测定。共有19个体内磷酸化位点被定位在与C.reinhardtii中的15个基因相对应的蛋白质中。同时测定了七种蛋白质的氨基末端乙酰化。六种成熟LHCII蛋白的氨基酸序列末端与预测的不同。状态1到状态2的转变诱导PSII核心成分D2和PsbR的磷酸化,次要LHCII触角亚基CP29的四倍磷酸化,以及主要LHCII复合物Lhcbm1和Lhcbm10的成分磷酸化。藻类细胞暴露在中等或高强度的光照下会导致PSII核心的D1和CP43蛋白的额外磷酸化。高光处理导致CP29在七个不同残基处的特异性过度磷酸化,另一种次要LHCII成分CP26在单个苏氨酸处的磷酸化,以及主要LHCII复合物的额外亚基的双重磷酸化,包括Lhcbm4、Lhcbm6、Lhcbm9和Lhcbm11。环境诱导的PSII核心和相关触角蛋白界面蛋白磷酸化,特别是CP29连接蛋白的多重差异磷酸化,提出了控制光合作用状态转变和LHCII在强光胁迫下与PSII解偶联以允许热能耗散的机制。

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