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.2005年11月15日;443(1-2):53-9.
doi:10.1016/j.abb.2005.08.016。 Epub 2005年9月15日。

通过HepG2细胞中谷氨酰胺的可用性鉴定参与ASCT2表达刺激的启动子元件以及FXR/RXR二聚体的可能参与

附属公司

HepG2细胞中谷氨酰胺有效性刺激ASCT2表达的启动子元件的鉴定以及FXR/RXR二聚体的可能参与

克莱尔·邦加德等。 Arch Biochem生物物理. .

摘要

当细胞在谷氨酰胺存在下培养时,人肝癌细胞系HepG2中谷氨酰胺转运蛋白ASCT2的表达增加,这是由于ASCT2启动子的刺激所致。对一些启动子结构的分析将激活位点定位在-653和-543碱基之间。凝胶位移分析在该序列的24bp区域内发现了一个IR-1重复序列,该序列结合了至少两个核蛋白。在含有谷氨酰胺的培养基中生长的细胞中,与该位点结合的蛋白质显著高于不含谷氨酰胺的细胞。与该启动子元件结合的高分子量物种的身份可能是FXR/RXR二聚体。FXR和RXR的同时过表达增加了不含谷氨酰胺的细胞中的启动子活性,其程度与谷氨酰胺的添加相同;谷氨酰胺和FXR/RXR表达的影响不是相加的。启动子结构中FXR/RXR结合位点的突变消除了谷氨酰胺和FXR/RXR刺激。实时PCR显示FXR mRNA水平在谷氨酰胺作用下显著升高。FXR启动子的活性也因谷氨酰胺而增加。这些结果表明,谷氨酰胺刺激ASCT2表达部分涉及FXR/RXR与ASCT2启动子的结合。

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