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.2005年9月16日;280(37):32200-8.
doi:10.1074/jbc。M505738200。 Epub 2005年7月20日。

趋化因子-糖胺聚糖结合:利用FTICR质谱技术研究CCR2配体与高硫酸化寡糖结合的特异性

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趋化因子-糖胺聚糖结合:利用FTICR质谱技术研究CCR2配体与高硫酸化寡糖结合的特异性

余永浩等。 生物化学杂志. .
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勘误表in

  • 生物化学杂志。2005年12月9日;280(49):41124. Hsu,Andro R【新增】

摘要

最近研究表明,几种趋化因子的体内活性需要糖胺聚糖(GAG)。最起码,这种相互作用被认为提供了一种保留在分泌部位和形成趋化因子梯度的机制,这些趋化因子梯度为携带受体的细胞提供方向线索,特别是在存在剪切力的情况下。因此,关键问题是确定与特定趋化因子结合的GAG的序列和结构。在此,我们描述了一种质谱分析方法,该方法用于检测蛋白-低聚糖类非共价复合物,在本例中是趋化因子-GAG相互作用,并选择高亲和力GAG。通过电喷雾电离将完整的非共价络合物从溶液转移到气相的能力,促进了这一过程。可以根据络合物的质量计算元素组成和结合化学计量比。针对一个结构变异有限的小的、高度硫酸化的肝素寡糖库筛选趋化因子受体CCR2的配体(MCP-1/CCL2、MCP-2/CCL8、MCP-3/CCL7、MCP-4/CCL13和Eotaxin/CCL11)和CCR10配体CTACK/CCL27。结果显示肝素八糖含有11和12硫酸盐作为粘合剂。在GAG结合时观察到一些趋化因子的低聚化,而在其他情况下仅鉴定出单体非共价络合物。结果表明,与几个趋化因子结合并激活同一受体的趋化因子系统中的明显冗余相反,这些趋化因子可以根据其与肝素寡糖复合物的化学计量比分为两组。

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