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.2005年4月15日;280(15):14485-91.
doi:10.1074/jbc。M500135200。 Epub 2005年2月7日。

多分散蛋白质的亚单位交换:质谱揭示αA晶体蛋白截短的后果

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多分散蛋白质的亚单位交换:质谱揭示αA晶体蛋白截短的后果

J安德鲁·阿奎利纳等。 生物化学杂志. .
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摘要

小分子热休克蛋白α-晶体蛋白通过与结构受损蛋白协同作用,在保持晶状体透明度方面起着关键作用。这在人类晶状体中尤其重要,因为蛋白质在个体的一生中都会受到翻译后修饰。在这里,我们研究了αA结晶蛋白的一种特殊修饰的结构和功能后果,该修饰涉及5个C末端残基的截短(αA(1-168))。使用新的质谱方法和已建立的生物物理技术,我们表明αa(1-168)形成低聚物组合,其平均分子质量低于野生型αa晶体蛋白(αa(WT))。从αA(WT)和αA(1-168)组装体的质谱中也可以明显看出,含有偶数个亚基的低聚物占主导地位;有趣的是,这种偏好对alphaA(1-168)更为明显。为了检测组装体之间的亚基交换速率,我们将αB晶体蛋白与αa(WT)或αa(1-168)混合,并在实时质谱实验中监测异低聚体的形成。结果表明,当涉及到αa(1-168)时,交换率显著降低。然而,这些减少的交换动力学对伴侣效率没有影响,发现αA(WT)和αA(1-168)的伴侣效率非常相似。因此,总的来说,我们的结果允许我们得出这样的结论:与植物、酵母和细菌中的类似蛋白质所建立的机制不同,亚基交换速率不是决定哺乳动物αA-晶体蛋白有效伴侣行为的关键参数。

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