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.2005年5月；10(5):426-8.
doi:10.1038/sj.mp.4001644。

塞来昔布抑制COX-2增强糖皮质激素受体功能

F胡, X王, T W W速度, 吴先生, A H米勒

塞来昔布抑制COX-2增强糖皮质激素受体功能

F胡等。 摩尔精神病学. 2005年5月.
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图1
图1
（a） 用MMTV荧光素酶构建体稳定转染的PC12细胞在12孔培养板中生长至80%汇合，并用塞来昔布（Cbx）和山莨菪碱（Anis）单独或组合以所示浓度处理。在加入塞来昔布之前，用茴香霉素和塞来昔布加用茴香菌素处理的细胞培养1小时。培养5小时后收集细胞，并评估荧光素酶活性。每个数据点代表至少三个单独实验的平均值±SE**指示P（P）与对照组相比<0.001，**表示P（P）与Cbx单独使用相比<0.001。（b） 为了评估GR核转位，PC12细胞在有无Dex的情况下用塞来昔布（50μM）处理5小时（10 nM，2小时）。使用来自ABR-亲和生物试剂（Golden，CO，USA）的GR抗体，通过Western blot分析每个治疗组的核提取物（25μg）。核提取物通过在高盐缓冲液（20 mM HEPES，pH 7.9，420 mM NaCl，10 mM KCl，0.1 mM Na）中重新悬浮核颗粒获得三VO（旁白）41 mM EDTA、1 mM EGTA、20%甘油、0.5 mM PMSF和1 mM DTT），并在4°C下剧烈摇晃30分钟。然后以48000 rpm（4°C）离心30 min后收集核提取物。GR-糖皮质激素受体。肌动蛋白被用作加载控制。（c） 使用EMSA和32P标记的合成双链GRE寡核苷酸（5′-AAG ATT CAG GTC ATG ACC TGA GGA）。数据来自三个独立实验的代表性实验。（d） 为了检测处理对p38 MAPK的影响，在细胞经塞来昔布（50μM）和/或茴香霉素（50 ng/ml）处理后，分离细胞总提取物。使用磷酸化p38 MAPK单克隆抗体通过Western blot分析每个治疗组的蛋白质（50μg）。
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