Regulation of longevity in Caenorhabditis elegans by heat shock factor and molecular chaperones

doi:10.1091/mbc.e03-07-0532

.2004年2月；15(2):657-64.

doi:10.1091/mbc.e03-07-0532。 Epub 2003年12月10日。

热休克因子和分子伴侣对秀丽隐杆线虫寿命的调节

詹姆斯·莫利¹, 理查德·森本一世

附属公司

PMID： 14668486
预防性维修识别码：项目经理329286
内政部： 10.1091/mbc.e03-07-0532

热休克因子和分子伴侣对秀丽隐杆线虫寿命的调节

詹姆斯·莫利等。摩尔生物细胞. 2004年2月.

.2004年2月；15(2):657-64.

doi:10.1091/mbc.e03-07-0532。 Epub 2003年12月10日。

作者

詹姆斯·莫利¹, 理查德·森本一世

隶属关系

¹美国伊利诺伊州埃文斯顿西北大学莱斯生物医学研究所生物化学、分子生物学和细胞生物学系，邮编60208。

PMID： 14668486
预防性维修识别码：项目经理329286
内政部： 10.1091/mbc.e03-07-0532

摘要

在长寿突变动物中观察到的寿命和抗应激能力之间的相关性表明，感知和应对环境挑战的能力对于调节寿命可能很重要。因此，我们研究了热休克因子（HSF-1）在长寿调节中的作用，HSF-1是应激诱导基因表达和蛋白质折叠稳态的主要转录调节因子。通过RNA干扰下调hsf-1抑制胰岛素样信号（ILS）通路中突变体的寿命，ILS通路在秀丽隐杆线虫神经系统中起作用，影响衰老。在ILS突变体中，hsf-1也是温度诱导dauer幼虫形成所必需的。利用野生型或显性阴性HSF-1的组织特异性表达，我们证明HSF-1在多个组织中起作用，以调节寿命。HSF-1的转录靶标个体分子伴侣的下调也会降低长寿突变动物的寿命，但野生型动物的寿命不会降低。然而，个别伴侣的抑制程度较小，这表明伴侣网络发挥着重要作用。ILS与HSF-1的相互作用可能是一种重要的分子策略，将寿命调节与控制细胞感知和应对压力能力的古老基因开关结合起来。

PubMed免责声明

数字

**图1。**
胰岛素样信号突变体对寿命的抑制作用*hsf-1（RNAi*). （A）野生型（N2）和*年龄1（hx546*)在用RNAi载体转化的细菌上生长的突变动物*daf-16，hsf-1*，或如图所示为空向量。（B）寿命*daf-2（e1370*)和*旧-1（zIs3000*)有或没有动物*hsf-1型*RNAi。（C）比较中观察到的缩短寿命*daf-16（mgDf50*)对照生长的无效突变体或*hsf-1型*RNAi细菌。统计分析（见表1）。（D）野生型Dauer地层（N2）或*年龄1（hx546*)在27°C的温度下在指定的RNAi细菌上生长的动物。数据是来自一个实验的重复平板的平均值±SEM。三项独立试验得出了类似的结果。（E）表观荧光图像显示*C12C8.1（hsp70）：：gfp*野生型（N2）报告基因或*hsf-1（RNAi*)动物在33°C下热休克1小时后恢复8小时。

**图2。**
HSF-1在多个组织中发挥作用，调节寿命。（A）表达标记基因的野生型（N2）或转基因动物的寿命(*肌-2：：gfp*)单独或与*let-858：：hsf-1*或*let-858：：hsf-1*Δ（编码残基290-671秀丽线虫HSF-1）。（B）仅表达标记的转基因动物的寿命(*肌-2：：gfp*)或与*hsf-1型*体壁内肌肉(*unc-54：：hsf-1*)，肠(*vha-6:：hsf-1型*)或神经系统(*F25B5.3：：hsf-1*). 数据是两个独立转基因系的代表性实验。重复行之间没有发现显著差异。报告的数据代表了两项产生类似结果的独立试验。在每种情况下，在相同的实验中并行测试适当的对照。统计分析见表2。

**图3。**
HSF-1需要存在于多种组织中，以延长*年龄1（hx546*)动物。（A）寿命*年龄1（hx546*)仅表达标记(*肌-2：：gfp*)或与*hsf-1型*全身肌肉、肠道或神经系统中的显性阴性（HSF-1 DN）*年龄1（hx546*)动物。所示数据代表了表达每个结构体的两个独立转基因株系的结果。重复行之间没有发现显著差异。实验在两个独立的试验中进行，结果相似。统计分析见表2。（B）显示a表达的荧光图像*秀丽线虫hsp-70:：gfp*报告者在热休克后，在野生型或转基因动物的体壁肌肉细胞中表达HSF-1显性阴性。箭头，体墙肌肉细胞。箭头，咽部。

**图4。**
需要分子伴侣*年龄1（hx546*)寿命。（A-H）寿命曲线*年龄1（hx546*)在表达控制载体的细菌或指示的RNAi细菌上从幼年成年期生长的动物。同时测量所有寿命，显示的载体控制数据在每个面板中是相同的。报告的数据代表了两项产生类似结果的独立试验。在每种情况下，在同一实验中并行测试适当的对照。统计分析见表4。（I-K）Hsp40（I，3=T05C3.5，4=F39B10.2）和Hsp70（J，5）的RNAi失活分析=*热休克蛋白-1*，6=C30C11.4，7=C12C8.1）和Hsp90(*daf-21型*)通过RT-PCR检测基因。在33°C下热休克1小时后，使用TRIzol试剂从3天大的动物中提取总RNA。肌动蛋白（A）扩增作为对照。与Hsp70家族成员之间的高度序列一致，在C30C11.4 RNAi中观察到C12C8.1表达的一些交叉干扰。

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