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比较研究
.1992年12月25日;267(36):26104-9。

通过对蛋白C衍生物的突变分析,可以区分钙在凝血酶激活蛋白C中的作用和凝血酶-血栓调节蛋白复合物

附属公司
  • PMID: 1334492
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比较研究

钙在凝血酶激活蛋白C和凝血酶血栓调节蛋白复合物中的作用可以通过蛋白C衍生物的突变分析来区分

A R Rezaie公司等。 生物化学杂志. .
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摘要

凝血酶和血栓调节蛋白之间的复合物在内皮细胞上催化蛋白C活化。钙离子在有血栓调节蛋白存在时刺激蛋白C活化,在无血栓调节蛋白时抑制蛋白C活化。蛋白质C在P3和P3’位置相对于Arg169-Leu的可剪断键具有天冬氨酸残基。为了确定这些残基对激活Ca2+效应的贡献,我们表达了人类4-羧基谷氨酸(Gla)-无域蛋白C和3个突变体,它们在P3、P3’和这两个位置具有Asp-->Gly取代。通过固有荧光的变化以及凝血酶和凝血酶-血栓调节蛋白与可溶性血栓调节蛋白衍生物复合物(第四到第六个表皮生长因子域)激活的Ca2+依赖性来监测Ca2+与蛋白C衍生物的相互作用。突变体对Ca2+的亲和力降低了3-6倍,这反映在凝血酶-血栓调节蛋白复合物半最大激活率所需的Ca2+浓度发生了类似变化。然而,Ca2+不再仅通过凝血酶有效抑制突变体的激活。我们的结论是:1)天冬氨酸残基在凝血酶对蛋白C激活的钙依赖性抑制中起着特殊作用;2) 这些突变改变了Ca2+对高亲和力结合位点的亲和力;和3)P3和P3'位点的天冬氨酸残基对凝血酶-血栓调节蛋白复合物的快速激活没有积极作用。

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