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.2002年8月30日;277(35):31585-92.
doi:10.1074/jbc。M204335200。 Epub 2002年6月21日。

转向基序是一种磷酸化开关,调节Hsp70与蛋白激酶C的结合

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转基序是一个磷酸化开关,调节Hsp70与蛋白激酶C的结合

天燕高等。 生物化学杂志. .
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摘要

热休克蛋白在确保细胞蛋白正确折叠和成熟方面发挥着核心作用。这里,我们表明热休克蛋白Hsp70在延长活化蛋白激酶C的寿命方面具有新的作用。我们在蛋白激酶C羧基末端结合伙伴的筛选中鉴定出Hsp70。免疫共沉淀实验表明,Hsp70特异性结合非磷酸化转基序(Thr(641)在蛋白激酶CβII中,蛋白激酶C家族成员成熟过程中三个启动位点之一磷酸化。通过在体内共同表达编码蛋白激酶C羧基末端或Hsp70羧基末端的融合蛋白,可以消除Hsp70与蛋白激酶C的相互作用。脉冲期实验表明,Hsp70并不调节蛋白激酶C的成熟:在有或无干扰结构的情况下,磷酸化处理的速率是相同的。相反,Hsp70延长了成熟蛋白激酶C的寿命;相互作用的破坏促进成熟蛋白激酶C和去磷酸化蛋白激酶C在细胞的洗涤剂不可溶部分中的积累。此外,对K562细胞的研究表明,破坏与Hsp70的相互作用会减缓蛋白激酶CβII介导的细胞从PMA诱导的生长停滞中恢复。最后,我们证明了AGC超家族的其他成员(Akt/蛋白激酶B和蛋白激酶A)也通过其非磷酸化转基序结合Hsp70。我们的数据与Hsp70结合成熟蛋白激酶C去磷酸化羧基末端的模型一致,从而稳定蛋白质并允许酶重新磷酸化。这种相互作用的破坏可以防止再磷酸化,并将酶作为下调的靶点。

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