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.2002年8月9日;277(32):29028-35.
doi:10.1074/jbc。M111697200。 Epub 2002年5月10日。

肾胱氨酸保守结构域参与靶向上皮细胞-细胞连接、与丝氨酸相互作用和建立细胞极性

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肾胱氨酸保守结构域参与靶向上皮细胞-细胞连接、与丝氨酸相互作用和建立细胞极性

约翰·唐纳森等。 生物化学杂志. .
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摘要

肾胱氨酸是一种常染色体隐性遗传囊性肾病,儿童和年轻人罹患。由于肾胱氨酸的正常细胞功能在很大程度上尚不清楚,疾病发病机制的分子缺陷仍不清楚。对人类和其他物种的肾胱氨酸氨基酸序列进行分析,发现了三个不同的保守结构域,包括Src同源性3和N末端的线圈结构域,以及一个与其他蛋白质没有明显同源性的大的高度保守的C末端区域,因此被称为“肾胱胺酸同源结构域”(NHD)。本研究的目的是通过定义保守结构域的功能特性来了解肾胱氨酸的功能。我们分析了一系列在Madin-Darby犬肾脏和COS-7细胞中表达的肾胱氨酸缺失突变体。该分析揭示了NHD以前未被认识的功能属性,包括促进自我结合和上皮细胞-细胞连接靶向性的能力。我们进一步观察到,通过跨上皮电阻测量,稳定表达具有Src同源性3结构域缺失的肾胱氨酸突变体的Madin-Darby犬肾细胞系建立紧密连接的能力降低。最后,通过双杂交筛选和联合免疫沉淀研究,我们确定了肌动蛋白结合蛋白丝氨酸家族的成员具有与NHD相互作用的能力。这些发现支持肾胱氨酸作为一种对接蛋白的功能性作用,该对接蛋白参与组织蛋白复合体,以调节上皮细胞-细胞粘附部位的肌动蛋白细胞骨架,并进一步表明这些特性对建立上皮细胞极性很重要。

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