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.2002年3月;82(3):323-33.
doi:10.1038/lipinvest.3780426。

异位端粒酶表达产生永生活化的人肝星状细胞

附属公司
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端粒酶异位表达产生永生活化的人肝星状细胞

伯恩德·施纳布尔等。 实验室投资. 2002年3月.
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摘要

端粒缩短控制细胞进入衰老。端粒酶催化亚单位(人类端粒酶逆转录酶或hTERT)的功能性表达可稳定端粒长度并延长各种正常人类细胞的寿命。我们的目的是评估端粒酶活性和端粒维持在调节活化的人肝星状细胞(HSC)增殖中的作用,以建立一个不朽的人HSC细胞系。从正常肝脏的手术标本中分离出人类HSC,并感染表达hTERT的逆转录病毒。hTERT的异位表达重建了人类HSC的端粒酶活性并维持了端粒长度。对照组人类HSC要么未感染,要么感染了仅含有新霉素耐药基因的逆转录病毒载体,但没有检测到端粒酶活性,端粒略有缩短。这些端粒酶阴性的HSC在大约9到15代后进入非分裂状态并衰老。相比之下,迄今为止,端粒酶阳性HSC已经经历了69代。端粒酶阳性的HSC没有发生致癌转化,表现出活化HSC的形态和功能特征。微阵列和RT-PCR分析表明,端粒酶阳性HSC中的mRNA表达模式与激活的人类HSC中非常相似。将端粒酶阳性的HSC沉积在基底膜样基质上,使其恢复为更静止的表型。总之,将hTERT引入活化的人类HSC可以使其永生并保持其活化表型。这一新开发的细胞系将成为研究培养中人类HSC细胞生物学的有用工具。

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