N-Terminally extended human ubiquitin-conjugating enzymes (E2s) mediate the ubiquitination of RING-finger proteins, ARA54 and RNF8

doi:10.1046/j.1432-1327.2001.02169.x

.2001年5月；268(9):2725-32.

doi:10.1046/j.1432-1327.2001.02169.x。

N-末端延伸的人泛素结合酶（E2）介导环指蛋白、ARA54和RNF8的泛素化

伊藤K¹, S阿达奇, 岩上R, H安田, Y Muto（Y Muto）, N Seki（N塞基）, Y Okano公司

附属公司

PMID： 11322894
内政部： 10.1046/j.1432-1327.2001.02169.x

免费文章

N-末端延伸的人类泛素结合酶（E2s）介导RING-finger蛋白、ARA54和RNF8的泛素化

伊藤K等。欧洲生物化学杂志. 2001年5月.

免费文章

.2001年5月；268(9):2725-32.

doi:10.1046/j.1432-1327.2001.02169.x。

作者

伊藤K¹, S阿达奇, 岩上R, H安田, Y Muto（Y Muto）, N Seki（N塞基）, Y冈野

附属

¹日本岐阜大学医学院分子病理生物化学系。

PMID： 11322894
内政部： 10.1046/j.1432-1327.2001.02169.x

摘要

我们之前已经克隆了编码N末端延伸的III类人类泛素结合酶（E2s）、UBE2E2和UBE2E3的cDNA，其生物学功能尚不清楚。在这项研究中，我们对与UBE2E2相互作用的蛋白质进行了酵母双杂交筛选，并鉴定了两种RING-finger蛋白ARA54和RNF8。在酵母双杂交分析中，ARA54（一种配体依赖性雄激素受体辅激活剂）和RNF8与III类E2（UBE2E2、UbcH6和UBE2E3）相互作用，但与其他E2（UbcH5、UbcH7、UbcH10、hCdc34和hBendless）不相互作用。使用UBE2E2和RING-finger蛋白的各种缺失突变体以及两个RING点突变体ARA54 C（220）S和RNF8 C（403）S，其中RING结构被破坏，表明UBE2的UBC结构域和这些RING-fing蛋白的RING结构域参与了这种关联。在昆虫Sf9细胞中表达的野生型ARA54和RNF8在体外催化E2依赖性的自泛素化，而点突变蛋白的活性显著降低。还观察到COS-7细胞中表达的野生型ARA54和RNF8的泛素化，蛋白酶体抑制剂MG132阻止了这些野生型蛋白质的降解，但对环突变体的保护作用要小得多。用绿色荧光蛋白嵌合物转染COS-7细胞表明，RNF8定位于细胞核，ARA54定位于细胞质和细胞核。我们的结果表明，ARA54和RNF8可能在某些核蛋白的泛素化中充当Ub-连接酶（E3）。

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